1、1.3 基因工程的应用学习目标 1.说出植物基因工程取得的成果。2.关注动物基因工程的应用前景。3.了解基因工程药物和基因治疗。方式一 基因工程自 20 世纪 70 年代兴起后，在短短的几十年间，得到了飞速的发展，目前已经成为生物科学的核心技术。基因工程在实际应用领域农牧业、工业、环境、能源和医疗卫生等方面，也展示出美好的前景。我们今天就一起来分享一下它的成果吧！方式二 胰岛素是治疗糖尿病的特效药。一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每 100 kg 胰腺只能提取 45 g 胰岛素。用该方法生产的胰岛素产量低，价格昂贵，远不能满足社会需要。1979 年，科学家将动物体内的胰岛
2、素基因与大肠杆菌 DNA 分子重组，并在大肠杆菌内实现了表达。1982 年，美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场，售价降低了 30%50% 。可以看出利用转基因微生物生产药物与传统的制药相比的优越性：无需大型装置和大面积厂房就可以生产出大量药品、降低生产成本，减少生产人员和管理人员，而且可以解决传统制药中原料来源不足的问题。基因工程取得了哪些丰硕成果，还有哪些进展，让我们一起来学习吧。一、植物基因工程硕果累累1抗虫转基因植物(1)杀虫基因种类：Bt 毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等。(2)成果：转基因抗虫棉、水稻等。2抗病转基因植物(1)抗病基因种
3、类：抗病毒基因：病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因等。抗真菌基因：几丁质酶基因、抗毒素合成基因等。(2)成果：抗烟草花叶病毒的转基因烟草、抗病毒的转基因小麦等。3抗逆转基因植物抗逆基因 作用 成果调节细胞渗透压基因改变细胞内渗透压，提高抗盐碱、抗干旱能力抗盐、抗旱烟草抗冻蛋白基因 提高耐寒能力 耐寒番茄抗除草剂基因 抗除草剂 抗除草剂玉米4.利用转基因改良植物的品质(连线)归纳总结 抗虫转基因植物与抗病转基因植物项目 抗虫转基因植物 抗病转基因植物方法从某些生物中分离出具有杀虫活性的基因，将其导入作物中将抗病基因导入植物中基因种类Bt 毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素
4、基因等抗病毒基因：病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因抗真菌基因：几丁质酶基因和抗毒素合成基因成果 转基因抗虫棉、转基因抗虫水稻等抗烟草花叶病毒的转基因烟草和抗病毒的转基因小麦、甜椒、番茄等意义减少了化学农药的使用，降低了生产成本，减少了环境污染，降低了对人体健康的损害例 1 目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是( )A苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达B抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可通过传粉、受精的方法，使抗虫性状遗传下去C标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因D转基因抗虫棉经过种植，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫
5、答案 C解析 苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后需用农杆菌转化法导入棉花的叶肉细胞，不能直接进入棉花的叶肉细胞表达，A 项错误；叶肉细胞是体细胞，其基因不能通过有性生殖进行遗传，可以通过植物组织培养技术，使抗虫性状遗传下去，B 项错误；构建好的基因表达载体中必须含有标记基因，以便于确定目的基因是否进入受体细胞内，C 项正确；棉铃虫抗性的产生是基因突变的结果，但抗虫棉的自然选择会使棉铃虫的抗性基因频率升高，D项错误。例 2 以下关于植物基因工程应用的说法，正确的是( )A我国转基因抗虫棉是转入了植物凝集素基因培育出来的B可用于转基因植物的抗虫基因只有植物凝集素基因和蛋白酶抑制剂基因C抗真菌转
6、基因植物中，可使用的基因有几丁质酶基因和抗毒素合成基因D提高作物的抗盐碱和抗干旱的能力，与调节渗透压的基因无关答案 C解析 我国的抗虫棉是转入了 Bt 毒蛋白基因培育出来的；抗虫基因主要有 Bt 毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等；利用可以调节细胞渗透压的基因，可提高作物抗盐碱和抗干旱的能力。二、动物基因工程的前景项目应用 基因来源或处理 成果提高动物的生长速度 外源生长激素基因 转基因绵羊、转基因鲤鱼改善畜产品的品质 肠乳糖酶基因转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量少转基因动物生产药物药用蛋白基因乳腺蛋白基因的启动子等乳腺(房) 生物反应器转基因动物作器官移植的供体抑制
7、或除去抗原决定基因结合克隆技术培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官归纳总结1乳腺生物反应器(1)乳腺(房) 生物反应器：科学家将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的药品，因而称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。(2)过程(如图所示 )2列表比较乳腺生物反应器与工程菌生产药物的区别比较内容 乳腺生物反应器 工程菌基因结构动物基因结构与人类的基因结构基本相同细菌和酵母菌的基因结构与人类有较大差异基因表达 合成的药物蛋白与天然
8、蛋白质相同 细菌合成的药物蛋白可能没有活性生产条件不需严格灭菌；温度等外界条件对其影响不大需严格灭菌，严格控制工程菌所需的温度、pH、营养物质浓度等外界条件药物提取 从动物乳汁中提取 从微生物细胞或其培养液中提取例 3 上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药用蛋白含量提高了 30多倍，以下与此有关的叙述中，正确的是( )A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物B.“提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因C.只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛
9、乳腺细胞中是纯合的D.转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不能合成人白蛋白答案 D解析 体细胞中出现新基因有可能是基因突变导致的，故 A 错误；“提高基因的表达水平”是指增强白蛋白基因表达，白蛋白基因数目没有增多，故 B 错误；“转基因动物”一般用到的受体细胞是受精卵，发育个体的几乎所有细胞中都有相同的外源基因，故 C 错误；转基因牛的白蛋白基因也是选择性表达的，在肌肉细胞中不能表达，故 D 正确。例 4 下列有关利用乳腺生物反应器与微生物生产药物的叙述，错误的是( )A前者在乳汁中提取药物，后者在细胞中提取B前者是在畜牧业中的应用，后者是在工业生产中的应用C前者合成的
10、蛋白质可加工成熟，后者合成的蛋白质一般不能加工成熟D两者与人体基因结构均相同答案 D三、基因工程药物及基因治疗1基因工程药物(1)概念：基因工程药物是指利用转基因的工程菌生产的药物。(2)原理：通过基因工程技术，使外源基因在工程菌细胞内高效表达。(3)成果：人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、激素等。(4)作用：预防和治疗人类肿瘤、心血管疾病、遗传病、各种传染病、 糖尿病、类风湿等疾病。2基因治疗(1)概念：把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。(2)成果：将腺苷酸脱氨酶基因转入患者的淋巴细胞中。(3)途径：分为体内基因治疗和体外基因治疗。(4)现状：处于初期
11、的临床试验阶段。归纳总结1体外基因治疗和体内基因治疗的比较途径比较 体外基因治疗 体内基因治疗方法从患者体内获得某种细胞细胞培养体外完成基因转移筛选、细胞扩增输入体内外源基因载体携带 体内 转 移 相应组织细胞不同点特点 操作复杂，但效果可靠 方法较简单，但效果难以控制相同点都是将外源基因导入靶细胞，以纠正缺陷基因，目前两种方法都处于临床试验阶段2.基因诊断与基因治疗的比较项目 方法 备注基因诊断制作相应探针，利用 DNA 分子杂交原理，快速、准确检测人类某种疾病临床应用阶段基因治疗把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，可分为体外基因治疗和体内基因治疗两种方法仅处于初期的临床试验阶段，仍有许
12、多问题和困难制约该技术的发展例 5 人类基因治疗报道，在美国佛罗里达大学基因治疗中心接受基因治疗的三名遗传性失明患者都重新获得了一定的视力，并且没有严重的副作用。基因治疗是指( )A把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的B对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的C运用人工诱变方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变，从而恢复正常D运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的答案 A解析 基因治疗只是将正常的基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，而细胞中的缺陷基因并未修复，和正常基因同时存在，基因治疗也不是切除病变基因
13、或诱发其突变，因而 B、C 、D 项的说法都不符合基因治疗的概念。例 6 近年来基因工程的发展非常迅速，科学家可以用 DNA 探针和外源基因导入的方法进行遗传病的诊断和治疗，下列做法不正确的是( )A用 DNA 探针检测镰刀型细胞贫血症B用 DNA 探针检测病毒性肝炎C用导入外源基因的方法治疗半乳糖血症D用基因替换的方法治疗 21 三体综合征答案 D解析 基因工程是基因水平上的现代生物技术，而 21 三体综合征属于染色体异常遗传病，患者的第 21 号染色体比正常人多一条，无法从基因水平上治疗。1提高农作物抗盐碱和抗干旱能力的目的基因是( )A抗除草剂基因 B调节细胞渗透压的基因C抗冻蛋白基因
14、DBt 毒蛋白基因答案 B 解析 由于盐碱和干旱对农作物的危害与细胞内渗透压调节有关，所以可以利用一些调节细胞渗透压的基因来提高农作物抗盐碱和抗干旱的能力。2下列哪项不是植物基因工程技术的主要应用( )A提高农作物的抗逆性 B生产某些天然药物C改良农作物的品质 D作器官移植的供体答案 D解析 D 项为动物基因工程技术的重要应用。3从转基因牛、羊乳汁中提取药物工艺简单，甚至可直接饮用治病。如果将药用蛋白基因转入动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中，从转基因牛、羊尿液中提取药物比从乳汁中提取药物的更大优越性在于( )A技术简单B膀胱上皮细胞容易表达药用蛋白C膀胱上皮细胞全能性较高D无论是雌性还是雄性个体，
15、在任何发育时期都可以产生所需药物答案 D解析 利用动物乳腺生物反应器生产药物要受动物性别和发育期的限制，若从尿液中获取药物，则无论是雌性还是雄性个体，在任何发育期都可以产生所需药物。4下列关于基因工程应用的叙述，正确的是( )A基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B基因诊断的基本原理是 DNA 分子杂交C一种基因探针能检测水体中的所有病毒D原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良答案 B解析 基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗的目的，并不是把缺陷基因诱变成正常基因；基因诊断是用放射性同位素、荧光分子等标记的 DNA 分子作探针，利用 DNA 分子杂交的原理，鉴定被检测标本
16、上的遗传信息，达到检测疾病的目的；基因探针具有专一性，一般来说，一种基因探针只能检测水体中的一种相应的病毒；原核生物的基因也是 DNA，可以用于真核生物的遗传改良。5科学家们对一位缺乏腺苷酸脱氨酶基因而患先天性体液免疫缺陷症的美国女孩进行基因治疗，其方法是首先将患者的白细胞取出做体外培养，然后用反转录病毒将正常腺苷酸脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。(1)基因治疗是把健康的_导入有_ 的细胞中，以达到治疗疾病的目的。(2)在基因治疗过程中，反转录病毒的作用相当于基因工程操作工具中的_。此基因工程中的目的基因是_，目的基因
17、的受体细胞是_。(3)将转基因细胞多次回输到患者体内后，免疫能力趋于正常是由于白细胞中能合成_。(4)人的腺苷酸脱氨酶基因与胰岛素基因相比，其主要差别是_。答案 (1)外源基因 基因缺陷 (2)载体( 或基因的运载工具) 腺苷酸脱氨酶基因 白细胞 (3)腺苷酸脱氨酶 (4) 脱氧核苷酸的排列顺序不同解析 基因治疗就是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的。反转录病毒的作用是作为载体，将目的基因(腺苷酸脱氨酶基因) 导入白细胞中，目的基因在受体细胞中经过转录和翻译，表达产生腺苷酸脱氨酶。人的不同基因所含有的脱氧核苷酸的排列顺序是不同的。对点训练题组一 植物基因工程1下列转基因
18、植物与所选用的目的基因对应错误的是( )A抗虫棉Bt 毒蛋白基因B抗病毒转基因烟草几丁质酶基因C抗盐碱和抗旱植物调节细胞渗透压的基因D耐寒的番茄抗冻基因答案 B解析 抗病毒转基因植物常使用病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因作为目的基因；几丁质酶基因及抗毒素合成基因一般是抗真菌转基因植物的目的基因。2能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是( )A单倍体育种 B杂交育种C基因工程育种 D多倍体育种答案 C解析 要让动物蛋白在植物体内表达，必须将控制动物蛋白合成的相关基因导入植物细胞中并让其表达，因此需要通过基因工程技术才能实现。3转基因食品已大量进入我们的日常生活，如转基因西红柿、转基因草莓等，涉及
19、的问题甚至关系到国家之间的贸易竞争，如图为“霸占中国市场的转基因大豆油”的部分图示。下列关于转基因大豆的叙述，不正确的是( )A培育过程中可能用到抗病、抗虫等抗性基因B目的基因的受体细胞可以是大豆受精卵，也可以是体细胞C转基因大豆的种植过程中减少了农药等的使用量，生产成本更低D固氮菌的固氮基因也是必需的目的基因之一答案 D解析 豆科植物可与含固氮基因的根瘤菌共生，故固氮基因并非必需的目的基因。题组二 动物基因工程4下列有关动物基因工程的说法，错误的是( )A将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速率B将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大降低C利用基因
20、工程技术，得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药品的生产问题D用转基因动物作为器官移植的供体时，由于导入的是调节因子，而不是目的基因，因此无法抑制抗原的合成答案 D解析 用转基因动物作为器官移植的供体时，可将器官供体基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆器官。5动物基因工程前景广阔，最令人兴奋的是利用基因工程技术使哺乳动物成为乳腺生物反应器，以生产所需要的药品，如转基因动物生产人的生长激素。科学家培养转基因动物成为乳腺生物反应器时( )A仅仅利用了基因工程技术B不需要乳腺蛋白基因的启动子C利用基因枪法将人的
21、生长激素基因导入受精卵中D需要进入泌乳期才能成为 “批量生产药物的工厂”答案 D解析 科学家培养转基因动物时除涉及基因工程外，还涉及其他现代生物技术；生产生长激素时需要将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射技术导入哺乳动物的受精卵中，然后将受精卵送入母体内使其生长发育成转基因动物。6科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的 DNA 中，培育出羊乳腺生物反应器，使羊乳汁中含有人凝血因子。以下有关叙述正确的是( )A可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组 DNA 分子导入羊的受精卵B在该转基因羊中，人凝血因子存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞C人凝
22、血因子基因开始转录后，DNA 聚合酶以 DNA 分子的一条链为模板合成 mRNAD科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达答案 A解析 目的基因导入受精卵中，因此转基因羊的体细胞中都含有目的基因；转录过程是由RNA 聚合酶参与催化的，DNA 聚合酶催化 DNA 复制过程，而不作用于转录；乳腺蛋白基因的启动子与人凝血因子基因重组在一起，导入受精卵中。题组三 基因工程药物和基因治疗7下列不属于利用基因工程技术制取的药物是( )A从大肠杆菌体内制取白细胞介素B在酵母菌体内获得干扰素C在青霉菌体内获取青霉素D在大肠杆菌体内获取胰岛素答案 C解析 运用基
23、因工程技术可以使外源基因在受体细胞中表达生产基因产品，A、B、D 均为外源基因的表达，而青霉菌产生青霉素是一种正常基因的正常表达，故青霉素不属于基因工程药物。8基因工程在诊断遗传病上发展尤为迅速，目前可以对几十种遗传病进行快速诊断，所采用的方法是( )A基因工程生产药物B导入正常基因C利用 DNA 探针诊断D用“工程菌”治疗疾病答案 C解析 基因诊断是利用 DNA 分子作探针，检测标本的遗传信息，从而达到检测疾病的目的，其原理是 DNA 分子杂交。9治疗白化病、苯丙酮尿症等人类遗传病的根本途径是( )A口服化学药物B注射化学药物C采取基因治疗法D利用辐射或药物诱发使致病基因突变答案 C解析 遗
24、传病是受基因控制的，要想彻底根治，只有通过基因工程技术，将正常的基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这就是基因治疗。虽然用辐射或药物诱发致病基因突变，可以改变原有的异常基因，但在一般情况下，突变大多是有害的，很可能引起另一种疾病，A 、B 项所提到的方法不能根治。综合强化10腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷病，对患者采用基因治疗的方法是：取出患者的淋巴细胞，进行体外培养时转入正常 ADA 基因，再将这些淋巴细胞注射入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。下列有关叙述中，不正确的是( )A正常 ADA 基因替换了患者的缺陷基因B正常 ADA 基因
25、通过控制 ADA 的合成来影响免疫功能C淋巴细胞需在体外扩增后再注射入患者体内D腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于先天性免疫缺陷病答案 A解析 基因治疗是将正常的基因导入到有基因缺陷的细胞中，正常的 ADA 基因可以通过控制合成正常的 ADA 来影响免疫功能；为获得大量含 ADA 正常基因的淋巴细胞，需在体外扩增后再注入患者体内；腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于先天性免疫缺陷病。11应用基因工程的方法，可将酵母菌制造成“工程菌” ，用于生产乙肝疫苗，在制造该“工程菌”时，应向酵母菌中导入( )A乙肝病毒的表面抗原B抗乙肝病毒抗体的基因C抗乙肝病毒的抗体D乙肝病毒的表面抗原基因答案 D解析
26、 利用基因工程生产乙肝疫苗时，应该向酵母菌中导入乙肝病毒的表面抗原基因。12动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品。大致过程如图所示。下列有关说法错误的是( )A通过形成的重组质粒具有人的药用蛋白基因、启动子、终止子和标记基因即可B通常采用显微注射技术C在转基因母牛的乳腺细胞中人的药用蛋白基因才会得以表达，因此可以从乳汁中提取药物D该技术生产药物的优点是产量高、质量好、易提取答案 A解析 要让药用蛋白基因在乳腺
27、细胞内表达并分泌含药物的乳汁，重组质粒上还必须具有乳腺蛋白基因的启动子等调控组件，A 项错误；转基因动物通常利用的受体细胞是受精卵，采用显微注射技术，B 项正确；只有母牛到达泌乳期，乳腺细胞才会表达相应的药用蛋白基因，乳汁中含有药物，C 正确；从乳汁里提取药物，优点突出，使动物本身成为“批量生产药物的工厂” ，D 项正确。13干扰素是治疗癌症的药物，成分是一种糖蛋白，它必须从血液中提取，每升人血液只能提取 0.05 g，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚的基因公司用下图的方式生产干扰素，试分析回答下列问题：(1)从人的淋巴细胞中取出_，使它同质粒相结合，然后移植到酵母菌体内，让酵母菌_。(2)酵
28、母菌能用_方式繁殖，速度很快，能大量生产 _，不但提高了产量，也降低了成本。(3)有人尝试将干扰素基因与大肠杆菌的质粒重组，转入大肠杆菌体内后，形成“工程菌” ，此种操作能制备到干扰素吗？_，请说明理由：_。答案 (1)干扰素基因 合成干扰素 (2)出芽生殖 干扰素 (3)不能 大肠杆菌是原核生物，无内质网、高尔基体等细胞器，无法合成糖蛋白解析 (1)通过基因工程构建“工程菌”的方法是：从淋巴细胞中取出干扰素基因，与质粒结合形成重组质粒，并通过相应的检测与鉴定得到转基因酵母菌，然后通过培养该酵母菌，使之合成大量干扰素。(2)酵母菌能进行出芽生殖，迅速繁殖菌体，同时也能大量生产干扰素。(3)由于
29、大肠杆菌是原核生物，无内质网、高尔基体等细胞器，无法合成糖蛋白，因此通常不用来制备干扰素。14如图所示为人体正常红细胞和镰刀型细胞贫血症患者红细胞形态及镰刀型细胞贫血症的基因治疗过程，请回答以下问题：(1)_图细胞为镰刀型细胞贫血症的红细胞。这种病是由_造成的。(2)图中 A 为_，D 为_。(3)写出以下过程的操作内容：_；用携带正常基因的载体(病毒 )侵染造血干细胞；_；_。(4)该方法属于_(填 “体内”或“体外”)基因治疗，其特点是_。(5)患者身体康复后，所生子女是否会携带镰刀型细胞贫血症基因？请说明理由。_。答案 (1)乙 基因突变 (2)合成血红蛋白的正常基因( 或目的基因) 造
30、血干细胞 (3) 将正常基因插入载体中 将载体(携带正常基因) 导入造血干细胞染色体上 将经过改造的造血干细胞输入患者骨髓中并产生正常的血细胞 (4)体外 操作复杂但效果较为可靠 (5)如果该患者的镰刀型细胞贫血症是由于个体发育的受精卵时期基因突变引起的，子女会携带该致病基因；如果患者的镰刀型细胞贫血症是由于个体发育过程中后天基因突变引起的，其生殖细胞中不含致病基因，因此，不管是否经过基因治疗，子女都不含该致病基因解析 (1)由于基因突变使红细胞形态上成为镰刀状而易破碎，故图甲是正常红细胞，图乙是镰刀型细胞。(2)在基因治疗过程中，A 为目的基因，可以与载体结合后导入受体细胞中；D 作为受体细
31、胞应是具有持续分裂能力的造血干细胞。(3)基因治疗过程有四个步骤： 是将正常基因插入到载体中；是用携带正常基因的载体(病毒) 侵染造血干细胞； 为将基因表达载体导入受体细胞 D 的染色体上； 为将具有正常功能的造血干细胞转移至体内，由此可知，此过程为体外基因治疗，其特点是操作复杂但效果较为可靠。(5)基因突变若发生在体细胞内一般不遗传给后代，若发生在生殖细胞中可能遗传给后代。15(2015江苏，32)胰岛素 A、B 链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图 1 是该方法所用的基因表达载体，图 2 表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B 分别表示 -半乳糖苷酶与胰岛素 A
32、、B 链融合的蛋白)。请回答下列问题：(1)图 1 基因表达载体中没有标注出来的基本结构是_ 。(2)图 1 中启动子是_酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是_。(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有_ 。(4)-半乳糖苷酶与胰岛素 A 链或 B 链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于_。(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的 A 链或 B 链，且 -半乳糖苷酶被切成多个肽段，这是因为_。(6)根据图 2 中胰岛素的结构，请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是_，
33、理由是_。答案 (1)终止子 (2)RNA 聚合 作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来 (3)限制酶和 DNA 连接酶 (4)防止胰岛素的 A、B 链被菌体内蛋白酶降解 (5)-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素 A、B 链中不含甲硫氨酸 (6)至少 2 个 两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸 R 基中可能还含有游离的氨基解析 基因表达载体包含启动子、终止子、目的基因和标记基因等。启动子是 RNA 聚合酶的识别和结合位点。氨苄青霉素抗性基因可作为标记基因。基因工程使用的工具酶包括限制酶和 DNA 连接酶。胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏起来，将无法被蛋白酶所识别，防止被水解。溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，若经溴化氰处理相应融合蛋白能获得完整的 A 链和 B 链，表明胰岛素 A 链、B 链上并无溴化氰作用位点，不能将其切断；同理，-半乳糖苷酶能被切成 “多个肽段” ，表明其具有多个切点(即“甲硫氨酸”)。胰岛素分子含有两条链，至少有 2 个游离的氨基分别位于 2 条肽链的一端，并且 R 基中可能也含有游离的氨基。
