1、分离特定的微生物并测定其数量分离特定的微生物并测定其数量 基础过关基础过关 1分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( ) 加尿素 不加尿素 加琼脂 不加琼脂 加葡萄糖 不加葡萄糖 加硝酸盐 不加硝酸盐 A B C D 答案 C 解析 土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，从而为其生长提供氮源。 培养基中只加尿素一种氮源，分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长；分离微生物要 用固体培养基；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源。 2用来判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是( ) A未接种的选择培养基 B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C接种了的牛
2、肉膏蛋白胨培养基 D接种了的选择培养基 答案 C 解析 将菌液稀释相同的倍数，分别接种于选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基，在牛肉膏蛋 白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，因此，需设置牛肉膏蛋 白胨培养基作为对照。对照遵循的是单一变量原则，所以与选择培养基一样接种、培养。 3尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培养基时( ) A葡萄糖在培养基中越多越好 B尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮 C尿素在培养基中越少越好 D尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮 答案 D 解析 尿素既可以作为尿素分解菌的氮源，也可以作为其碳源，葡萄糖在培养基中并不是越 多越好
3、，A 项错误；尿素分解菌没有固氮能力，故培养基中需要添加尿素作为氮源，B 项错 误；添加尿素作为唯一氮源，使其他微生物不能很好地生活在该培养基上，从而将尿素分解 菌筛选出来，尿素在培养基中不是越少越好，过少就失去选择作用，过多又会使细胞失水死 亡，C 项错误；尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮，D 项正确。 4在做分离分解尿素的细菌实验时，A 同学从对应 106培养基上筛选出大约 150 个菌落，而 其他同学只选择出大约 50 个菌落。A 同学的结果的产生原因不可能有( ) A由于土样不同 B由于培养基污染 C由于操作失误 D没有设置对照 答案 D 解析 实验结论是否正确和是否设
4、置对照有直接关系，但实验结果和是否设置对照无关。 5某混合样品中微生物 R 的含量极少，要得到大量的 R，比较理想的方法是采用( ) A天然培养基 B涂布平板法 C利用适合 R 生长但同时抑制或阻止其他种类的微生物生长的选择培养基 D用显微镜直接观察、寻找，再培养 答案 C 解析 在微生物的培养过程中可以通过利用适合该微生物生长繁殖而抑制其他微生物生长繁 殖的培养基，使微生物 R 能在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖。 6 下表是关于对四种生物能源、 碳源、 氮源、 新陈代谢类型的描述， 其中正确的一组是( ) 硝化细菌 乳酸菌 根瘤菌 衣藻 能源 利用化学能 分解乳酸 固定 N2 利用光能
5、碳源 CO2 糖类 糖类 CO2 氮源 NH3 N2 N2 NO 3 代谢 类型 自养需氧型 异养厌氧型 异养需氧型 自养需氧型 A.硝化细菌与乳酸菌 B乳酸菌与根瘤菌 C根瘤菌与衣藻 D硝化细菌与衣藻 答案 D 解析 乳酸菌不能直接利用 N2，且能量来源为糖类；根瘤菌进行生命活动所需要的能量来自 于糖类等有机物氧化分解。 能力提升能力提升 7下列对菌落的表述不正确的是( ) A肉眼可见的菌落一般均是由许多种细菌大量繁殖形成的 B霉菌等在面包上生长形成的不同颜色的斑块即为菌落 C噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解，从而使菌落变得透明 D细菌、放线菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同 答案 A 解
6、析 由于细菌间存在着竞争关系，故不同种类的细菌不可能生长在一起形成肉眼可见的菌 落；不同种类的微生物所形成的菌落具有一定的特征，可以作为菌种鉴定的重要依据；噬菌 体能在细菌体内增殖，从而使细菌裂解死亡。 8下列关于微生物分离和培养的有关叙述中，错误的是( ) A微生物培养前，需对培养基进行消毒 B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法 C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度 D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源 答案 A 解析 对培养基要进行灭菌，而不是消毒。 9菌落的特征包括( ) 菌落的形态 菌落的结构 菌落的大小 菌落的颜色 菌落的隆起程度 菌落 的数量 A B
7、 C D 答案 A 解析 菌落是由许多细菌聚集在一起构成的，没有一定的结构，菌落的数量也与菌种无关。 10 某课题小组欲研究被石油污染过的土壤中的细菌数量， 并从中筛选出能分解石油的细菌。 下列操作正确的是( ) A用牛肉膏蛋白胨培养基进行培养 B采用平板划线法对细菌进行计数 C采用涂布平板法分离菌种 D接种后须放在光照培养箱中培养 答案 C 解析 牛肉膏蛋白胨培养基为天然培养基，成分不明确，欲筛选出能分解石油的细菌，应用 以石油为唯一碳源的培养基进行培养，A 项错误；平板划线法能对细菌分离、纯化，但不能 对细菌进行计数，B 项错误；涂布平板法可以分离菌种还可以进行计数，C 项正确；接种后 须
8、放在恒温培养箱中培养，光照不是必要条件，D 项错误。 11下表为土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题使用的培养基，分析培养基配方，回答 下面的问题： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4 7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 琼脂 15.0 g 用蒸馏水定容到 1 000 mL (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是 。 (2)按物理性质划分该培养基属于 培养基，理由是培养基中含有 ； 该类培养基常用于微生物的 等。 (3)由于 ，所以该培养基只能用 于能够合成 的微生物的培养。用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛
9、选出 的细菌。 (4)在微生物学中，将 的培养基，称作选择培养基。 答案 (1)葡萄糖和尿素 (2)固体 琼脂 纯化、 分离、 计数 (3)培养基中只有尿素一种氮源 脲酶 分解尿素 (4)允许特定种类的微生物生长，并能抑制或阻止其他种类的微生物生长 解析 根据培养基的成分，可以推断培养基的类型以及适于培养的微生物的代谢类型。含有 琼脂、明胶等凝固剂的培养基为固体培养基；不含凝固剂的为液体培养基。不含碳源的培养 基适于自养微生物的培养，不含氮源的培养基适于固氮微生物的培养等。固体培养基常用于 菌种的纯化、分离、计数等；液体培养基常用于菌种的扩大培养和工业化生产。 12如图为分离并统计分解纤维素的
10、微生物的实验流程，据此回答下列有关问题： 土壤取样 梯度稀释 将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落，统计并计算每克样品中的细菌数 (1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明 。 (2)接种微生物最常用的是平板划线法和涂布平板法，本实验宜采用 法。 (3)用涂布平板法统计菌落数目时，最好选择菌落数在 的平板进行 计数。 若统计出在一稀释倍数为 105的平板上的平均菌落数为 30 个， 所用稀释液的体积为 0.2 mL，则每克样品中的菌落数为 个。 答案 (1)根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找 (2)涂布平板 (3)30
11、300 1.5107 解析 (1)因为纤维素分解菌和耐热菌有不同的生活习性，生活在不同的环境中，故要根据目 的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 (2)纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基，液体培养基宜采用涂布平板法来纯化该细菌。 (3)涂布平板的时候， 菌落数目太少和太多都不好， 因为太少的话不准确， 太多的话不好计数， 一般选取菌落数为 30300 的平板进行计数；根据公式可知，每克样品中的菌落数为 30 0.21051.5107(个)。 13生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇， 其技术流程为：纤维素酶解酵母菌发酵蒸馏成品。纤维素酶的成本
12、能否下降，是能否 实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取，某同 学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程： 土壤取样选择培养梯度稀释鉴别培养 结合所学知识回答下列问题： (1)最好选择怎样的环境采集土样？ 。 (2)下面是一种培养基配方：纤维素粉 5 g、NaNO3 1 g、Na2HPO4 7H2O 1.2 g、KH2PO40.9 g、 MgSO4 7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、酵母膏 0.5 g、水解酪素 0.5 g(蒸馏水定容到 1 000 mL)。该培 养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是 。 (3)纤维素分解菌培养液中的纤维
13、素酶产量如何呢？请设计实验进行检测。 。 答案 (1)纤维素丰富的土壤环境 (2)培养基中纤维素是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长 (3)向纤维素分解菌培养液中加入定量纤维素，定时测定葡萄糖产量的变化 解析 富含纤维素的土壤中，含有以纤维素为碳源的纤维素分解菌，且数量较多；题目中给 出的培养基能够为产生纤维素酶的微生物提供碳源，不能分解纤维素的微生物由于缺乏碳源 而不能正常生长繁殖，因此该培养基具有选择作用；纤维素量一定时，在一定范围内，纤维 素酶产量与分解产生的葡萄糖量成正比。 真题体验真题体验 14(2015 江苏，13)血球计数板是对细胞进行计数的重要工具，下列叙
14、述正确的是( ) A每块血球计数板的正中央有 1 个计数室 B计数室的容积为 1 mm1 mm0.1 mm C盖盖玻片之前，应用吸管直接向计数室滴加样液 D计数时，不应统计压在小方格角上的细胞 答案 B 解析 每块血球计数板的正中央有 2 个计数室，每个计数室的容积都是 1 mm1 mm0.1 mm，故 A 项错误，B 项正确；血球计数板使用时，先在计数室上加盖盖玻片，后沿盖玻片 边缘滴加样液使其慢慢渗入计数室，C 项错误；计数时统计相邻两条边线及其顶角上的细胞 数量，D 项错误。 15 (2016 江苏， 25)漆酶属于木质素降解酶类， 在环境修复、 农业生产等领域有着广泛用途。 下图是分离
15、、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是(多选)( ) A生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化 D斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株 答案 BC 解析 漆酶降解“木质素”，则漆酶菌株多存在于“木质素”丰富的场所，生活污水中含有 大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，A 项错误；产漆酶菌株可降解木质素，在筛选培 养基中加入木质素可筛选产漆酶的菌株，筛选时可通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，B 项正 确；在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化，C 项
16、正确；斜面培养基中含有大量 营养物，可在低温下长期保存菌株，D 项错误。 16(2017 全国，37)某些土壤细菌可将尿素分解成 CO2和 NH3，供植物吸收和利用。回答 下列问题： (1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生 。能分解尿素的细菌 不能以尿素的分解产物CO2作为碳源， 原因是 ， 但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 (答出两点即可)。 (2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择 (填 “尿素”“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是 。 (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有 KH2PO4和 Na2
17、HPO4，其作用有 (答出两点即可)。 答案 (1)脲酶 分解尿素的细菌是异养型生物， 不能利用 CO2来合成有机物 为细胞生命活 动提供能量，为其他有机物的合成提供原料 (2)尿素 其他两组都含有 NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用 NH4NO3，不能起到筛选作用 (3)为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中 pH 稳定 解析 (1)细菌分解尿素是由于细菌体内能合成脲酶，尿素是有机物，分解尿素的细菌是分解 者，属于异养型生物，因此不能利用 CO2作为碳源合成有机物。葡萄糖通常既作为碳源，也 作为能源。(2)筛选分解尿素的细菌，通常只能用尿素作为唯一氮源，“NH4NO3”或“尿素 NH4NO3”均含有无机氮源 NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用 NH4NO3，不能起到筛选作用。(3)KH2PO4和 Na2HPO4可为微生物提供 P 元素和无机盐离子 如钾离子和钠离子，还可作为缓冲剂保持细胞生长过程中 pH 稳定。
