1、检测（十八） “生物技术实践”课后强训卷1.(1)如图是利用_法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面得到的结果。(2)分析下面培养基的配方：NaNO 3、KH 2PO4、Na 2HPO4、KCl、MgSO 47H2O、H 2O。若此培养基用于筛选分解尿素的细菌，则应除去上述_成分，并加入_和葡萄糖，以补充_源。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和_，以提高萃取效率。鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常采用_法，在鉴定过程中需要用_作为对照。(4)橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生_问题，所以一般采用压榨法。解析：(
2、1)据图分析，图示接种方法为平板划线法，平板划线操作就是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(2)题干所给的培养基配方中缺少碳源，氮源是 NaNO3，若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应该使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，同时尿素分解菌属于异养型生物，需加入葡萄糖作为碳源。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和干燥，以提高萃取效率。鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常采用纸层析法，在鉴定过程中需要用标准样品作为对照。(4)橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法。答案：(1)平板划线 (2)NaNO 3
3、 尿素 碳源和氮源 (3)干燥 纸层析 标准样品 (4)原料焦糊2(2018珠海一模)地球上的植物每年产生的纤维素超过 70 亿吨，其中 40%60%被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶，某研究小组欲从土壤中分离得到纤维素分解菌，其操作流程如下所示，请回答相关问题。土壤取样选择培养梯度稀释鉴别培养基培养挑选产生透明圈的菌落(1)研究小组将滤纸埋在土壤里，30 天后再从已经腐烂的滤纸上提取土样筛选纤维素分解菌。请说说这么做的道理是什么？_。(2)上述流程成功的关键，是选择培养基的配方中要以_为唯一碳源。流程常用_染色法，过程利用染色法能够挑选出纤维素分解菌的原因是_。(3)
4、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术就是围绕如何避免杂菌的污染展开的。请列举几项该研究小组应该实施的无菌操作(如实验操作应在酒精灯火焰附近进行)_(答出两点即可)。为了证明培养基是否受到外来杂菌污染。需要设置空白对照，对照培养基的处理是_。(4)若用稀释涂布平板法来统计纤维素分解菌落的数量，发现测定的结果往往比实际活菌数量要少，原因是_。解析：(1)滤纸富含纤维素，能使纤维素分解菌相对聚集，故研究小组将滤纸埋在土壤里，30 天后再从已经腐烂的滤纸上提取土样能筛选出纤维素分解菌。(2)要筛选出纤维素分解菌，在培养基中应该加入纤维素作为唯一的碳源，流程常用刚果红染色法，过程利用染色法
5、能够挑选出纤维素分解菌的原因是刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物，纤维素分解菌分泌的纤维素酶可以分解纤维素，使培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，通过透明圈即可挑选纤维素分解菌。(3)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术是实验成败的关键，如对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，对实验器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。为了证明培养基是否受到外来杂菌污染。需要设置空白对照，对照培养基的处理是接种等量的无菌水，置于实验组相同的环境条件下培养。(4)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故用稀释涂布平板法来统计纤维素分解菌落的数量，测定的结果往往比实
6、际活菌数量要少。答案：(1)滤纸富含纤维素，能使纤维素分解菌相对聚集(或人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境) (2)纤维素 刚果红 刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物，纤维素分解菌分泌的纤维素酶可以分解纤维素，使培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，通过透明圈即可挑选纤维素分解菌 (3)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，对实验器皿、接种用具和培养基等进行灭菌 接种等量的无菌水，置于与实验组相同的环境条件下培养 (4)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落3根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：(1)从土壤中分离能分解尿素的细菌时，所用的选择培养基应以_
7、为唯一氮源。分解尿素的细菌由于含有脲酶，可将_而使周围环境的 pH 上升，在选择培养基中加入_指示剂，对其进行分离、鉴别。(2)由果酒制作转为果醋制作时，需要调整的温度范围是_。在制作腐乳的过程中，加盐和加酒都能够抑制_。(3)玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，其适合用水蒸气蒸馏法提取，理由是玫瑰精油具有_的性质。当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中影响玫瑰精油提取量的主要因素有蒸馏时间和_。如果蒸馏过程中不进行冷却，则玫瑰精油提取量会下降，原因是_。(4)DNA 在浓度为_ mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低。使用体积分数为 95%的冷却酒精可使 DNA_(填“析出”或“溶解”)
8、。解析：(1)从土壤中分离分解尿素的细菌时，应该选用以尿素为唯一氮源的选择培养基。尿素分解菌合成的脲酶，将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH 升高，导致酚红指示剂变成红色。(2)酒精发酵时一般将温度控制在 1825 ，醋酸发酵时一般将温度控制在 3035 。在制作腐乳过程中，加盐的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；加酒的目的是抑制微生物的生长，同时使腐乳具有独特的香味。(3)玫瑰精油具有易挥发、难溶于水、化学性质稳定等性质，故适合用水蒸气蒸馏法提取。蒸馏时许多因素都会影响产品的品质，如蒸馏温度、蒸馏时间等。蒸馏过程中要进行冷却，让混合物重新
9、分出油层和水层，若不冷却则会有部分玫瑰精油随水蒸气挥发而流失，使玫瑰精油提取量下降。(4)DNA 在浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低。使用体积分数为 95%的冷却酒精可使 DNA 析出。答案：(1)尿素 尿素分解成氨 酚红 (2)由 1825 调整为 3035 微生物的生长 (3)易挥发、难溶于水、化学性质稳定 蒸馏温度 部分玫瑰精油会随水蒸气挥发而流失 (4)0.14 析出4葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益。其生产流程如图所示，据图回答：(1)在筛选菌种 A 时，需要在接种前用_法对葡萄果汁进行灭菌。对于需
10、要长期保存的菌种，可以采用_的方法。(2)在纯化菌种 A 时接种了 5 个平板，每个平板均接种了 0.1 mL 样品并培养。其中乙平板的菌落分布如图，纯化菌种 A 的接种方法是_，推测出现平板乙可能的操作失误是涂布不均匀。其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、220、480、200，则样品中菌种 A 的数量为_个/mL，用该方法统计的结果，一般_(填“低于”或“高于”)实际值。解析：(1)葡萄果汁作为筛选菌种 A 时的培养基，需要在接种前用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法。(2)分析图中乙平板的菌落分布特点，可以推知采用的纯化方法是稀释涂布平板法；根据题意
11、，样品中菌种 A 的数量为(180220200)30.12 000(个/mL)；由于稀释涂布平板法的个别菌落可能来自两个或多个细胞，所以用该方法统计的结果，一般低于实际值。答案：(1)高压蒸汽灭菌 甘油管藏 (2)稀释涂布平板法 2 000 低于5青蒿素是从黄花蒿的茎叶中提取的无色针状晶体，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发。请回答以下问题：(1)从黄花蒿中提取青蒿素时，应采用_法，所选用的有机溶剂为_(填“乙醇”或“乙酸乙酯”)，通常在提取前将黄花蒿茎叶进行粉碎和_，以提高效率。提取过程中宜采用_加热以防止燃烧、爆炸，加热时瓶口要安装_装置，所得液体浓缩前进行_。(2)玫瑰精油是从玫瑰花中提
12、取的，其原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合的乳浊液呈_色，此时向乳浊液中加入氯化钠，就会出现明显的分层现象，可用分液漏斗将其分开，然后再加入_，经过滤可得到纯精油。解析：(1)根据题干信息“青蒿素易溶于有机溶剂、不溶于水、不易挥发” ，所以应采用萃取法从黄花蒿中提取青蒿素。乙醇是水溶性有机溶剂，萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以乙醇不能用于青蒿素的萃取；乙酸乙酯不与水混溶，沸点高，因此可用于青蒿素的萃取。通常在提取前将黄花蒿茎叶进行粉碎和干燥，以提高效率。提取过程中宜采用水浴加热以防止燃烧、爆炸，加热时瓶口要安装回流冷凝装置，所得液体浓缩前进行过滤。(2)玫瑰精油
13、是从玫瑰花中提取的，其原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合的乳浊液呈乳白色，此时向乳浊液中加入氯化钠，就会出现明显的分层现象，可用分液漏斗将其分开，然后再加入无水硫酸钠吸水，经过滤可得到纯精油。答案：(1)萃取 乙酸乙酯 干燥 水浴 回流冷凝(冷凝回流或冷凝) 过滤 (2)乳白 无水硫酸钠6(2018重庆模拟)下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。请回答：(1)图中选择培养基应以_为唯一氮源；鉴别培养基还需添加_作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成_色。(2)腐乳制作的实验流程示意图如下： 豆 腐 长 出 毛 霉 A 加 卤 汤 装
14、瓶 密 封 腌 制图中 A 代表_。在配制卤汤中酒的含量一般控制在_左右。(3)工厂利用苹果生产果汁、果酒和果醋的大致工艺流程如下：苹 果 预 处 理 果 汁 发 酵 果 酒 发 酵 果 醋严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件包括_(至少写出两项)。(4)玫瑰精油的提取实验中，对初步接收到的乳浊液进行如下处理：玫 瑰 油 与 水的 混 合 物 试 剂 A 分层 装 置 B 油层 试 剂 C 无 水 玫瑰 精 油 过 滤 较 纯 净 的玫 瑰 精 油试剂 A 是_，试剂 C 的作用是_。(5)桉树油一般从新鲜的桉树叶中提取，过
15、程如下： 桉 树 叶 水 A 油 水混 合 物 分 离油 层 除 水 桉 树 油提取桉树油釆用的方法是_。解析：(1)脲酶能够催化尿素分解为氨，故图中选择培养基应以尿素为唯一氮源，鉴别培养基还需添加酚红作指示剂。由于尿素被脲酶分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，从而使酚红指示剂变红。(2)腐乳制作的实验流程：豆腐长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。在配制卤汤中酒的含量一般控制在 12%左右。(3)生产果酒、果醋时需控制的发酵条件包括：温度、溶氧量、pH 等。(4)玫瑰精油的提取实验中，对初步接收到的乳浊液要先用 NaCl 改变溶液的密度，使其出现分层现象，然后用分液漏斗获得含有一定水的
16、油层，再加入无水硫酸钠，除去玫瑰油中的水分，再过滤除去固体硫酸钠就可以得到玫瑰精油了。(5)提取桉树油釆用的方法是水蒸气蒸馏法。答案：(1)尿素 酚红 红 (2)加盐腌制 12% (3)温度、溶氧量、pH (4)NaCl 除去玫瑰精油中的水分 (5)水蒸气蒸馏法7(2018南充模拟)泡菜制作简单，易于储存，开胃提神，醒酒去腻，老少适宜，是家喻户晓的一种佐餐菜肴。以下是有关泡菜制作的一些问题，请分析作答：(1)制备泡菜的盐水中盐与清水的质量比约为_，盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是_。(2)在泡菜腌制过程中经常向坛口边缘的水槽中补充水分目的是提供_环境。在发酵初期会有气泡从坛沿水槽内的水中间歇
17、性溢出，这些气泡来源于_。(3)发酵后期，乳酸含量继续增加，当达到 1.2%以上时，发酵速度渐渐变缓甚至停止，主要原因是_。(4)若制作的泡菜“咸而不酸” ，最可能的原因是_。(5)发酵过程中会产生亚硝酸盐，亚硝酸盐在特定条件下会转变成致癌物_，所以在发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量，以把握取食泡菜的最佳时机。亚硝酸盐含量的检测方法是_，在检测泡菜中亚硝酸盐含量的实验中，必须先制备已知浓度的_，将显色反应后的样品与其进行比对。解析：(1)制备泡菜的盐水中盐与清水的质量比约为 14，盐水需煮沸并冷却后才可使用，加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。(2
18、)在泡菜腌制过程中，经常向坛口边缘的水槽中补充水分目的是提供无氧环境。在发酵初期会有气泡从坛沿水槽内的水中间歇性溢出，这些气泡是微生物呼吸作用产生的气体和泡菜坛中剩余的空气。(3)发酵后期，乳酸含量继续增加，当达到 1.2%以上时，pH过低会抑制了乳酸菌的生长，从而使发酵速度渐渐变缓甚至停止。(4)若制作的泡菜“咸而不酸” ，最可能是盐过多抑制了乳酸菌发酵。(5)发酵过程中会产生亚硝酸盐，亚硝酸盐在特定条件下会转变成致癌物亚硝胺，所以在发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量，以把握取食泡菜的最佳时机。亚硝酸盐含量的测定利用比色法，在检测泡菜中亚硝酸盐含量的实验中，必须先制备已知浓度的标准显色液，将
19、显色反应后的样品与其进行比对。答案：(1)14 加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响 (2)无氧 微生物呼吸作用产生的气体和泡菜坛中剩余的空气 (3)pH 过低抑制了乳酸菌的生长 (4)盐过多抑制了乳酸菌发酵 (5)亚硝胺 比色法 标准显色液8(2018遂宁模拟)柠檬是常用的食品、工业原料，利用柠檬可生产柠檬果汁、柠檬精油、柠檬酒、柠檬醋、柠檬果酱等。利用有关知识回答下列问题。(1)如果用柠檬皮提取柠檬精油时，一般采用_法，不宜使用水蒸气蒸馏法的原因是_。为了提高出油率，要将柠檬皮_，并用石灰水浸泡。(2)如果用柠檬的果肉来生产柠檬酒，需要接种酵母菌，
20、从混杂的微生物中分离出酵母菌应使用_培养基。柠檬醋的生产是利用了_的发酵作用，当柠檬酒流经柠檬醋发酵瓶时，O 2消耗和 CO2产生的情况是_。(3)柠檬果酱是利用柠檬果汁加糖熬制的甜蜜酱，以家庭生产玻璃瓶装柠檬果酱为例，如何做到减少甚至避免杂菌污染？_(答 3 点)。解析：(1)用柠檬皮提取柠檬精油时，一般采用压榨法，采用水蒸气蒸馏法会由于温度过高使有效成分发生部分分解，水中蒸馏又会出现原料焦糊问题，因此一般不采用水蒸气蒸馏法。(2)从混杂的微生物中分离出酵母菌应使用选择培养基。柠檬醋的生产是利用了醋酸杆菌的发酵作用，当柠檬酒流经柠檬醋发酵瓶时，O 2消耗和 CO2产生的情况是只消耗 O2但不产生 CO2。(3)制作柠檬果酱时，为尽量减少甚至避免杂菌污染可以采取的措施有：柠檬果汁煮沸；装柠檬果酱的瓶用沸水(酒精)消毒；装瓶时瓶口通过酒精灯火焰。答案：(1)压榨法 水蒸气蒸馏法会导致原料焦糊和有效成分水解 干燥去水 (2)选择 醋酸杆菌 只消耗 O2但不产生 CO2 (3)柠檬果汁煮沸；装柠檬果酱的瓶用沸水(酒精)消毒；装瓶时瓶口通过酒精灯火焰
