1、第第 2 节节 微生物的培养技术及应用微生物的培养技术及应用 第第 1 1 课时课时 微生物的基本培养技术微生物的基本培养技术 A 组 基础对点练 题组一 培养基的配制 1下列有关培养基的叙述，正确的是( ) A培养基只能是天然物质 B微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 C固体培养基上可形成肉眼可见的菌落 D培养基只能培养细菌 答案 C 解析 培养基可以是天然物质，也可以是人工合成的物质，A 错误；微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌落，肉眼不能观察到单个细菌，B 错误、C 正确；培养基能培养细菌，也能培养真菌，D 错误。 2(2019 北京期中)已知某种细
2、菌以 CO2为唯一碳源，下列相关叙述正确的是( ) A可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型 B无机盐是该细菌不可缺少的营养物质 C培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质 D培养该细菌的培养基中不需要添加氮源 答案 B 解析 该细菌以 CO2为唯一碳源，可推测该细菌的代谢类型为自养型，但不能确定是不是需氧型，A 错误；微生物生长一般需要水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，B 正确；CO2不能为微生物提供能量，C 错误；氮源是微生物必需的营养物质，培养该细菌的培养基中需添加氮源，D 错误。 3(2020 四川成都月考)如表所示为某培养基的配方，下列叙述错误的是( ) 成分 NaNO3 K2HPO4 M
3、gSO4 7H2O (CH2O) 蒸馏水 青霉素 含量 3 g 1 g 0.5 g 30 g 定容至1 000 mL 0.1 万单位 A.根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B该培养基不能用于培养大肠杆菌 C根据培养基的配方可知，该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型 D固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基 答案 D 解析 固体培养基和液体培养基的区别在于是否加入凝固剂(如琼脂)，题表所示的培养基配方中没有琼脂， 因此属于液体培养基， A 正确、 D 错误； 加入青霉素会抑制细菌的生长繁殖，B 正确；该培养基中的(CH2O)可作为有机碳源，因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型
4、，C 正确。 题组二 无菌技术 4下列对于灭菌和消毒的理解，不正确的是( ) A灭菌是指杀灭环境中一切微生物，包括芽孢和孢子 B消毒和灭菌的实质是相同的 C接种环用灼烧法灭菌 D常用的灭菌方法有干热灭菌、湿热灭菌、灼烧灭菌 答案 B 5金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，实验中下列做法错误的是( ) A对接种环进行灼烧处理 B带菌培养基必须经湿热灭菌后才能倒掉 C带菌培养基必须经加热后才能倒掉 D接种后双手必须经肥皂洗净，再用体积分数为 70%的酒精棉球擦拭 答案 C 解析 带菌培养基必须经湿热灭菌后才能倒掉，简单的加热达不到灭菌效果，C 项错误。 6防止外来杂菌
5、的入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( ) A实验室里可以用煮沸消毒法或巴氏消毒法进行消毒 B接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的不充分燃烧层灼烧灭菌 C在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染 D玻璃器皿和金属用具等可以采用干热灭菌 答案 B 解析 灼烧灭菌应该在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，B 错误。 题组三 微生物的纯培养 7下列有关平板划线操作的叙述错误的是( ) A将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红 B接种环在平板上随机划线时不要划破培养基 C在蘸取菌液前后均要将盛有菌液的试管口通过火焰 D平板冷却后倒置，放
6、入恒温培养箱中培养 答案 B 8.如图是平板划线示意图，划线的顺序为 12345。下列操作方法正确的是( ) A操作前不用进行任何处理 B划线操作必须在火焰上进行 C在 5 区域中才可以得到所需菌落 D在 1、2、3、4、5 次划线的前后都要对接种环灭菌 答案 D 解析 划线之前应对接种环灼烧灭菌；划线操作在酒精灯火焰旁进行；从第 1 次划线至第 5次划线菌落密度越来越小，因划线所用菌种密度的不同，在第 3、4、5 次划线中都可能得到所需菌落。 9在平板划线法操作中，错误的是( ) A将接种环放在酒精灯火焰上灼烧，直到接种环烧红 B将烧红的接种环在酒精灯火焰旁边冷却 C接种环在平板上的划线位置
7、是随机的 D在蘸取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰 答案 C 解析 接种环灼烧及接种前后试管口要通过火焰，其目的是为了防止杂菌污染，将接种环先冷却再接种可以避免高温烫死菌种，因此 A、B、D 都是正确的；在平板上划线时，要划三至五条平行线，而不是随机划线，因此 C 选项错误。 10请回答下列与酵母菌的纯培养有关的问题： (1)制备培养基：培养基在接种前要进行_灭菌。 (2)接种和分离酵母菌：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 经数次划线后培养， 可以分离得到单菌落， 这种方法称为_。 (3)讨论分析： 纯化酵母菌时，_(填“可以”或“不可以
8、”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。 用该方法分离酵母菌时， 从第二次划线操作起， 每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是_ _。 大肠杆菌与酵母菌的最本质区别是_ _。 答案 (1)湿热 (2)平板划线法 (3)可以 线条末端的细菌数量少，最终可得到单菌落 大肠杆菌无以核膜为界限的细胞核 B 组 综合强化练 11下列有关微生物培养与应用的叙述，正确的是( ) A同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，所有碳源都能提供能量 B接种前需对培养皿、接种环进行灭菌处理，对操作者的双手等进行消毒处理 C培养不同的微生物，用同种成分的培养基即可 D微生物生长不可缺少的微量有机物有氨基酸、
9、维生素和蛋白胨等 答案 B 解析 同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，但自养微生物利用的无机碳源不提供能量，A 错误；培养不同的微生物，所用培养基的成分往往也有所不同，C 错误；微生物生长不可缺少的微量有机物主要包括氨基酸、维生素等，D 错误。 12高温灭菌的原理是( ) A每种微生物生长的最适温度是一定的 B微生物对于高温环境不适应 C高温破坏了微生物的蛋白质等生物大分子，影响其生命活动 D高温降低了环境中氧的浓度 答案 C 解析 高温的致死作用主要是使微生物的蛋白质等生物大分子物质发生不可逆转的变性。 13下列常用的无菌操作中，错误的是( ) A无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌 B牛奶
10、可用巴氏消毒法消毒 C实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行 D玻璃器皿(如吸管、培养皿)可用酒精擦拭进行灭菌 答案 D 解析 玻璃器皿应采用干热灭菌。 14(2019 湖北宜昌月考)下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述，正确的是( ) A倒好的培养基和培养皿要进行干热灭菌 B应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C为防止微生物侵入培养基，要在酒精灯火焰旁进行操作 D倒好培养基后，立即将平板倒过来放置，不需要冷凝 答案 C 解析 应该在倒平板之前将培养基进行湿热灭菌，将培养皿进行干热灭菌，A 错误；倒平板时，用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿，立即盖上皿盖，B
11、 错误；倒好培养基后，等培养基冷却凝固后再将平板倒过来放置，D 错误。 15下列依次表示倒平板、接种的位置以及平板划线法接种的路径的示意图，其中错误的是( ) 答案 D 解析 平板划线法除第一次划线外，以后的每一次划线都从上一次划线的末端开始。 16将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理，并放置在不同温度的环境中，培养 24 小时后，所得结果如表： 编号 a b c d e f 处理方法 接种大肠杆菌 接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素X 的圆纸片 接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素 Y的圆纸片 接种大肠杆菌，表面全被醋覆盖 接种大肠杆菌 无接种菌 温度 40 40 40 40
12、0 40 观察结果 全表面呈浑浊 纸片周围呈现一片清晰区，其余表面呈浑浊 全表面呈浑浊 全表面清晰 全表面清晰 全表面清晰 根据上述实验结果所作出的判断，错误的是( ) A编号 a 和 f 比较可知，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊 B根据编号 b 和 c 的观察结果，可知抗生素 Y 比抗生素 X 的杀菌能力强 C将编号 e 和 a 的结果比较可知，0 的环境不适合大肠杆菌生长 D若揭开编号 f 的盖子，24 小时后培养基表面会出现浑浊 答案 B 解析 a、f 的区别在于是否接种了大肠杆菌，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊，A 正确；将含有抗生素的纸片覆盖在大肠杆菌的培养基上，可根据培养基表面的浑
13、浊程度判定此种抗生素对大肠杆菌的杀菌能力，可知抗生素 X 的杀菌能力强于抗生素 Y 的杀菌能力，B 错误；e、a 形成对照，其变量是温度，由观察结果可知 0 的环境不适合大肠杆菌生长，C 正确；f 暴露在空气中后，会自然接种菌种，形成菌落，使培养基表面出现浑浊，D 正确。 17为了检测饮用水中是否含有某种微生物，配制的培养基的配方如下，请分析回答下列问题(注：伊红美蓝是由两种染色剂组成的细胞染料)： 蛋白胨 牛肉膏 乳糖 蔗糖 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水 10 g 5 g 5 g 5 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1 000 mL 将培养基 pH 调至 7.2 (1)该培养基所
14、含碳源有_，其功能是_。 (2)该培养基所含氮源有_，其功能是_。 (3)该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是_。 (4)该细菌在同化作用上的代谢类型是_型。 (5)该培养基可用来培养_(填“霉菌”或“细菌”)。 答案 (1)乳糖、蔗糖、牛肉膏 主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物 (2)蛋白胨 主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 (3)水、无机盐(或 K2HPO4) (4)异养 (5)细菌 解析 培养微生物需碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。由该培养基的 pH 为 7.2，呈弱碱性，可判断该培养基可用来培养细菌。 18在微生物连续培养时，一部分旧的液体培养基以一
15、定的速度流出，同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌 JA122 菌株接种到葡萄糖含量受到限制的液体培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题： (1)液体培养基中除了把葡萄糖作为_外，还应该含有_。 (2)样品中还发现了 CV101、CV103 新品种，对其菌株的代谢差异进行分析发现，CV103 对葡萄糖吸收率最高，代 谢终产物是醋酸盐。 进一步研究表明， CV101 可以在过滤的培养过 CV103 的培养基中生长，据此作出的推测是_。 请设计并完成下列实验，来验证你的观点： 配制_的固体培养基(A 组)和不含碳源的固体培养基(B 组)； 将等量且适量稀释的 CV101 菌液分别接种到 A、B 培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在_条件下进行。 预期实验结果：_。 答案 (1)碳源 氮源、水和无机盐等营养物质 (2)CV101 菌株能以 CV103 菌株产生的醋酸盐为碳源 以醋酸盐为唯一碳源 无菌(或适宜的温度等) A 组菌株生长(形成菌落)，B 组菌株不能生长(无菌落)