1、第第 2 2 课时课时 微生物的选择培养和计数微生物的选择培养和计数 知识点 1 选择培养基 1.(2019 山西省大同一中高二期中)下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( ) A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4 7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水 B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4 7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水 C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4 7H2O、尿素、琼脂、蒸馏水 D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4 7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水 解析 培养基中既有尿素作为唯一氮源，又有其他各种成分，可以选择出分解尿素的细菌，A 正确；无尿素作
2、氮源，B 错误；缺少碳源，不能正常生长，C 错误；有牛肉膏，可提供氮源的成分，D 错误。 答案 A 2.(2019 石河子第二中学高二月考)在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是( ) A.透明圈内的刚果红染料已被分解 B.菌落中的菌株降解纤维素能力最强 C.图中菌落可能是细菌也可能是真菌 D.图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制 解析 根据分析可知， 透明圈不显红色的原因是其中的纤维素已被分解， A 错误；菌落形成的透明圈直径与菌落直径之比最大， 说明菌落降解纤维素能力最强，B 错误；根据题干信息不能判断图中菌落的微生物类型，可能是细菌也可能
3、是真菌，C 正确；图中培养基应以纤维素为唯一碳源，不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D 错误。 答案 C 3.(2020 北京高二期末)禾草灵(FE)是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解 FE 的菌株，科学家通过实验获得 W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果(FE特征吸收峰在239 nm处)，以下说法不正确的是( ) A.应从大量使用 FE 的土壤中获取菌株 B.将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上 C.应使用以 FE 作为唯一碳源的培养基进行筛选 D.据吸收光谱可知，W1 菌株对 FE 有明显降解能力 解析 由于只有被除草剂严重污染过的土壤才可
4、能含有高效降解该除草剂的分解菌，所以为了获取能高效降解该除草剂的菌株，应从大量使用 FE 的土壤采集土壤样品，A 正确；为了淘汰不能分解 FE 的微生物，而仅保留能分解 FE 的菌种，则在配制选择培养基时应以 FE 作为唯一碳源， 应将土壤稀释液接种到以 FE 为唯一碳源的选择性培养基上进行筛选，B 错误，C 正确；据吸收光谱可知，经 W1菌株降解后在 239 nm 处的特征吸收峰明显减弱，说明 W1 菌株对 FE 有明显降解能力，D 正确。 答案 B 知识点 2 微生物的选择培养 4.(2020 山东省青岛二中高二期末)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀
5、粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，实验结果见下表。 菌种 菌落直径：C(mm) 透明圈直径：H(mm) H/C 细菌 5.1 11.2 2.2 细菌 8.1 13.0 1.6 有关本实验的叙述，错误的是( ) A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B.筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外 D.H/C 值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异 解析 培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等成分，A 正确；筛选淀粉分解菌时，需要对菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养，B 正确；
6、由题意可知，以上两种菌均会产生透明圈，说明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉，C 错误；淀粉分解菌的 H/C 越大，说明其产生的淀粉酶分解的淀粉相对越多，可说明该淀粉分解菌分解淀粉的能力越强，D 正确。 答案 C 5.(2019 江苏省高二期末)稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法，下列相关叙述中错误的是( ) A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 B.需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面 C.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理 D.不同浓度的菌液均可在固体培养基表面形成单个的菌落 解析 操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释，以使微生物
7、分散开，A 正确； 需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面， 选择菌落数在 30300个的培养基进行计数，B 正确；操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理，以避免杂菌污染，C 正确；若菌液浓度较大，在固体培养基表面可能出现多个菌落相连的现象，D 错误。 答案 D 6.(2019 石河子第二中学高二月考)用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括( ) A.对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物 B.倒平板时，培养基的用量与实验组必须完全相同 C.所用培养基成分及 pH 大小与实验组保持一致 D.对照组
8、和实验组均放在相同且适宜的条件下培养 解析 对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，为空白对照，A 不符合题意；进行倒平板时对照组培养基用量的大小与实验组不一定绝对相同，且对实验结果无影响，B 符合题意；pH 为无关变量，因此对照组所用培养基的成分及pH 应与实验组完全一致，C 不符合题意；对照组和实验组的培养基都要置于相同条件下培养，以保证单一变量，D 不符合题意。 答案 B 知识点 3 微生物的计数 7.(2019 甘肃省武威十八中高三月考)测定土壤中细菌数量一般选用 104、 105和 106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用 102、103和 104倍稀释，其原因是
9、( ) A.细菌个体小，真菌个体大 B.细菌易稀释，真菌不易稀释 C.细菌在土壤中数量比真菌多 D.随机的，没有原因 解析 土壤中的微生物大约 70%90%是细菌，真菌的数量要比细菌少。样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在 30300 之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。 答案 C 8.(2020 上海高二期末)在做分离分解尿素的细菌实验时， 甲同学从对应 106培养基上筛选出大约 150 个菌落，而其他同学只选择出大约 50 个菌落。下列有关叙述，出现科学性错误的是( ) A.甲同学出现
10、这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题 B.可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染 C.将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误 D.B、C 选项的实验思路都遵循了实验的对照原则 解析 甲同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染，A 正确；污染可能是培养基灭菌不彻底，或操作过程没有保证无菌操作，将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，B 正确；若是土样不同造成的，让其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，
11、 如果结果与甲同学一致， 则可以证明甲同学操作正确，C 正确；B 选项的实验思路遵循了实验的对照原则，C 选项的实验思路遵循了实验的重复性原则，D 错误。 答案 D 9.(2019 四川省成都外国语学校高二期中)用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为 106培养基中得到以下几种统计结果，正确的是( ) A.涂布 1 个平板，统计菌落数是 230 B.涂布 2 个平板，统计的菌落数是 215 和 260，取平均值 238 C.涂布了 3 个平板，统计的菌落数分别是 21、212、256，取平均值 163 D.涂布了 3 个平板，统计的菌落数分别为 210、240、250，取
12、平均值 233 解析 A、B 项中只涂布了 1 个和 2 个平板，所以 A、B 错误；C 项虽涂布了 3个平板，但是，其中 1 个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误， 数据重复性差， 不能简单地将 3 个平板的计数值用来求平均值，C 错误；D 项涂布了 3 个平板，并且数据接近，可重复性强，D 正确。 答案 D 10.(2020 江苏省高二月考)研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素的条件进行了研究。据图分析正确的是( ) A.筛选该高产菌株需要在牛肉膏蛋白胨培养基中添加纤维素 B.探究最适温度时应尽可能将发酵液的 pH 控制在 9 左右
13、C.该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是 35 D.利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境 解析 要筛选酵母菌纤维素酶高产菌株应在纤维素为唯一碳源的培养基培养，A错误；探究该酶的最适温度时，pH 为无关变量，应控制在最适 pH，即将发酵液的 pH 控制在 9 左右，B 正确；由于图中随着温度的升高，纤维素酶活性逐渐增高，还没有到达顶点，故 35 不一定是其最适温度，C 错误；酵母菌属于兼性厌氧型生物，既能进行有氧呼吸，也能进行无氧呼吸，故利用该高产菌株降解纤维素时不需严格保持厌氧环境，D 错误。 答案 B 11.(2019 广东省金山中学高二期中)S 型菌有荚膜且具有毒性，R 型菌无
14、荚膜也无毒性，二者对青霉素敏感。已知在多代培养的 S 型菌中存在能抗青霉素的突变型(记为 PenrS 型，且对青霉素的抗性不是荚膜产生的)。现用 PenrS 型菌和 R 型菌进行如图所示实验，下列分析最合理的是( ) A.甲组中部分小鼠患败血症，可用青霉素治疗 B.乙组中加入青霉素后有两种菌落继续生长 C.丙组培养基中生长的菌落是 PenrS 型菌 D.甲组小鼠体内分离的菌接种到含青霉素的培养基上只能产生一种菌落 解析 甲组中部分 R 型菌可转化为 PenrS 型菌， 使部分小鼠患败血症， 由于 PenrS型菌能抗青霉素，故不可注射青霉素治疗，A 错误；乙组中可观察到两种菌落，加青霉素后只有被
15、 PenrS 型的 DNA 转化的 R 型菌的菌落能继续生长，B 错误；丙组培养基中含有青霉素， R 型菌不能生长也不能发生转化， 所以不会出现菌落，C 错误；甲组小鼠体内分离的菌为 PenrS 型菌和 R 型菌，由于 R 型菌对青霉素敏感，PenrS 型菌抗青霉素，所以将分离的菌体接种到含青霉素的培养基上只能产生一种菌落，D 正确。 答案 D 12.(2018 全国卷，37)将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到 M 培养基。 回答下列问题： (1)M 培养基若用于真菌的筛选， 则培养基中应加入链霉素以抑制_的生长
16、，加入了链霉素的培养基属于_培养基。 (2)M 培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质， 营养物质类型除氮源外还有_(答出两点即可)。氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有_(答出两点即可)。 (3)若在 M 培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是_，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_ _ _。 (4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果： 甲同学涂布了 3 个平板，统计的菌落数分别是 110、140 和 149，取平均值 133；乙同学涂布了
17、 3 个平板，统计的菌落数分别是 27、169 和 176，取平均值 124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是_ _ _。 解析 (1)在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。若 M 培养基是用于真菌的筛选，则应加入链霉素以抑制细菌的生长， 其属于选择培养基。 (2)马铃薯浸出液中含有淀粉、蛋白质、脂质、无机盐、水等多种物质，因此，除氮源外其中还有微生物生长所需要的碳源、 无机盐等营养要素。 进入细胞的氮源可参与合成蛋白质、 核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(3)加入显色剂碘液后，淀粉遇碘变蓝，而淀
18、粉的水解产物则不发生这种反应。若在 M 培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，土壤中能产生淀粉酶的微生物可将淀粉分解，菌落周围就会出现透明圈，这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选能产淀粉酶的微生物了。(4)乙同学的结果中，1 个平板的计数结果与另 2 个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，结果的重复性太差，不能简单地将 3 个平板的计数值用来求平均值。 答案 (1)细菌 选择 (2)碳源、无机盐 蛋白质、核酸 (3)碘液 淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈 (4)乙同学的结果中，1 个平板的计数结果与另 2 个相差悬殊，结果的重复性差 13.(2020
19、北京十一学校高二期末)之前微博传言手机细菌比马桶按钮多。 如图所示为某机构通过实验展示调查的结果。回答下列相关问题： (1)该实验需制备培养基， 培养基的营养成分一般包括水、 碳源、 _等。 (2)在接种前需要检测培养基是否被污染，对于固体培养基常采用的检测方法是_。 (3)据图，两实验组均采用_法接种，该方法需要_(填字母，多选)。 A.接种环 B.酒精灯 C.移液管 D.涂布器 E.无菌水 (4)结果表明，手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。两组实验操作均正确且完全一致，但实验结果截然不同，你认为原因可能是_ _。 (5)根据实验结果，为了保证健康，手机使用一段时间后，应对手机进行_处理
20、。 解析 (1)培养基的营养成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐等。(2)可以通过将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，看是否有菌落产生来判断培养基是否被污染。(3)分析题图可知，两实验组均采用稀释涂布平板法接种，该方法需要酒精灯(操作都在酒精灯火焰旁进行)、移液管(吸取菌液)、涂布器(涂布菌液)、无菌水(稀释菌液)，而接种环用于平板划线法。(4)两实验组实验操作均正确且完全一致， 但实验结果截然不同， 原因可能是手机的取样和马桶按钮的取样都不相同。(5)根据实验结果，结合灭菌和消毒的应用范围，为了保证健康，每隔一段时间，应该对手机进行消毒处理。 答案 (1)氮源和无机盐 (2)将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间， 观察培养基上是否有菌落产生，若无菌落产生，则培养基未被污染；反之，则培养基被污染 (3)稀释涂布平板 BCDE (4)手机的取样和马桶按钮的取样都不相同(答案合理即可) (5)消毒