1、选修一关键知识点填空选修一关键知识点填空 实验一：大肠杆菌的培养和分离 1. 细菌以 繁殖。用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏 性和革兰氏 性的细菌，大肠杆菌是 （上述种类的哪一种） 、 （呼吸作用类型）的肠道细菌。 2. 培养基为生物生长提供营养，培养细菌常用 培养基，按照物理性质分为 培养基和 培 养基，前者主要用于 ，后者主要用于 。区别是是否添加 。灭菌之 调 节 pH 值。 3. 在培养微生物时，必须进行 操作，首要条件是各种器皿必须无菌，各种培养基也必须是无菌 的，目前一般的灭菌方法为 法， ， min，高压蒸汽灭菌锅压力必须降为 0 时才能打开，因为培养基会因为锅内 而喷出来。灭菌锅
2、加热后，需要等到水蒸气把锅内原有 的空气赶走后，才关闭气阀，此后气压和温度持续上升到指定数值后才开始计时。如果水蒸气没有把 空气完全赶走，会导致压力达到达标值后，温度没有达到目标值（因为空气比水蒸气更容易膨胀） 。 另外水蒸气的热穿透力强， 有利于杀死芽孢和孢子。 倒平板、 接种、 平板涂布、 平板划线都要在 旁 进行操作。为了使细菌繁殖更快，一般在 中进行恒温培养，而且将培养皿 ，其主 要原因是防止 。 4. 细菌扩大培养需要用 培养基，划线分离需要用 培养基，细菌喜 ，霉菌喜 ， 通常细菌的培养基用 来配置，还要加入一定量的 ，以维持一定的 。 霉菌培养基一般用 或 即可。 尽管培养基的配
3、方各不相同， 但其基本成分都一 样 （基本成分为碳源、 、 生长因子、 水、 无机盐） ， 实验结束后， 所有接触过细菌的器皿都要 处 理。 5. 细菌的分离方法有两种： 和 。划线分离法是用 蘸取菌液后在 上划线，在划线过程中菌液逐渐减少。划线最后，可使细菌间的距离加大。将接种后的 培 养 1020 小时， 一个细菌就会形成一个 。 如果再将每个菌落分别接种到固体培养基的 ， 则每个菌群就是由一个细菌产生的后代。 6. 添加培养基时需要注意三角瓶口、试管口、培养皿壁上不能沾有培养基，否则容易发生污染，转 移到三角牌和试管时必须使用 。 7. 7.涂布分离时，需要先将培养的菌液 ，然后取 0.
4、1ml 不同浓度的稀释度的菌液加在培养皿的 培养基上，用 涂布，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。通常每个培养皿中有 20 个 以 内 的 单 菌 落 为 最 合 适 。 在 数 菌 落 时 ， 实 际 菌 落 数 比 理 论 菌 落 数 偏 ， 原 因 是 。 使用过的培养基应该进行 处理后才能倒掉， 分离法方法简单， 分离法单菌落更容易分开，但操作复杂。 8. 是消除杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达菌株的方法之一。 9. 实验中使用的是 （何种棉花） ；实验用具在高压蒸汽灭菌后需要 处理；高压蒸汽灭菌 时各种器皿需要用 包好。 10. 消毒和灭菌，哪个作用比较温和： 。 11. 如
5、果要划线 4 次，那么需要将接种环灼烧几次： 。 12. 进行扩大培养时， 灼烧后的接种环如何冷却才能取菌种： 。 13. 大肠杆菌的分离实验需要 作为对照。 实验二：分离以尿素为唯一氮源的微生物 1. 尿素又称 ，是 讲解的产物，以尿素为氮源的细菌含有 从而可以降解尿素。 2. 细菌合成的 能将尿素分解成NH3（碱性） ， 使pH值变 ， 使培养基中加入的酸碱指示剂 遍 。 从而根据菌落周围红色环带区域大小代表 的活性。 3. 土壤是从 地方取得。从土壤分离以尿素为唯一氮源的细菌用 法分 离，用 （仪器）涂布。本实验应配置 培养基，并以 培养基作为对照，在 其中的 代替琼脂作为凝固剂。尿素遇
6、高温会分解，因此不能用常规的 法灭菌，而 采用 过滤使之无菌，之后接入灭菌后的培养基。另外酶溶液也可用此方法灭菌，G6 玻璃砂漏斗只能采用 的方法加快速度。尿素加入到灭好菌的固体培养基中，培养基呈现 （液 态、固态） 。 4. 尿素固体培养基在功能上属于： 培养基。 5. 培养时培养皿需 （摆放方向）培养，观察菌落数，实验组平板比对照组有 （更多、更少） 菌落。 实验四：果汁中的果胶和果胶酶 1. 是植物细胞壁的主要成分之一，作用是将 粘合在一起，能被 和 水 解。 果胶只被果胶酶水解产生 和 。 如果果胶被果胶酶和果胶甲酯酶共同水 解产生 。 和 都可以产生果胶酶果胶可以用 鉴定，果胶越多，
7、沉淀 越多。因此果胶酶在果汁生产中可以提高 和 。 实验六：-固定化淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。 1. 固定化酶 （1）概念： 将 的酶用 的方法固定在某种介质上， 使之成为 而又有 的 制剂。 （2）方法： 、 、 和 。 2.比较 类型 直接使用酶 固定化酶 优点 催化效率高，低耗能，低污染 a. 既能与反应物接触，又能与酶分离 b. 固定化酶可以被 缺点 a. 对环境要求非常敏感，容易失活 b. 成本高 c. 反应后酶混在产物中，影像产物质量。 不能进行一系列反应的催化。 3.-淀粉酶的固定化 （1）介质（教材中） ： ， （2）方法（教材中） ： 当一定浓度的淀粉经过固定化酶柱
8、时，淀粉水解成一种中间物质 ，该物质用 检测，显 色。-淀粉酶装柱后用十倍体积的蒸馏水洗涤的目的： 。实验后用十倍体积的 蒸馏水洗涤的目的： 。实验后放置在 中保存。 4. 此实验使用的是 （某种生物）的 （某种淀粉酶） 。 实验八：果酒和果醋的制作 1. 酵母菌是 （真核或原核） ，异养，兼性厌氧型，多以 进行繁殖。制作果醋的微生物 是 。这两种微生物都可以在培养基中进行 ，接种后，培养液中的乙醇浓度值超过 时，酵母菌会死亡。 2. 果酒制作的一般过程：葡萄消毒、冲洗、榨汁或捣烂、放入酵母、酒精发酵、过滤、沉淀。用葡 萄制作果酒，先用 浸泡葡萄，然后用 冲洗。去梗应该在此 （前、后） 。然后
9、用榨汁机 打成匀浆，转速要求 ，目的是 。干酵母用 调制成糊状，加入一小撮 ， 作用: 。等待酵母悬液中出现 即可。葡萄浆放入发酵瓶装量不超过 ，一般酿酒 适 宜 温 度 为 ， 瓶 口 橡 胶 塞 孔 插 弯 曲 的 玻 璃 管 并 装 水 原 因 ，当发酵瓶中 的时候，即表示发酵完毕。用葡萄利 作的葡萄酒不含糖，酒精含量也低。如制作酒精含量较高，糖含量也较高的果酒可以用 等水果， 并加入 ，如用苹果汁制作果酒，3 天后可看到气泡冒出，10 天后剧烈的发酵停止，上清液果酒可 用 法吸出。 3. 以下是酿酒和酿醋的简易过程 充气口设置开关:因酵母菌的大量繁殖需要氧气，醋杆菌是好氧细菌，所以在果
10、酒利作的前期和利 作果醋时利作充气口应 (打开或关闭);酵母菌进行酒精发酵时充气口应 (打开或关闭) 排气口设置弯道:由于在果酒发酵过程中 ，因此又需设排气口;为防止空气中微生物的 污染，排气口应连接一个长而弯曲的胶管。 (3) 出料口设置开关:因需要对发酵的情况进行及时监测，应设置开关便于 。 4. 三个瓶的瓶口用 盖住。甲瓶中装 800ml (果酒与蒸馏水的比例为 )，下口有带 活塞的管道连接至乙瓶,可以通过调节活塞控利流速，流速过快会导致乙瓶发酵不彻底（流速:每 分 钟 滴);乙瓶为 瓶，内装 过的 至 分满，将适量的醋化杆菌悬液或醋曲悬液加在，并调 pH 至 (用 O.1 mol/L
11、NaOH)倒入乙瓶。锯末的作用在于 。其下口用双孔橡胶塞塞紧。 其中一玻璃管连接至丙瓶，另一玻璃管塞有脱脂棉球，作用是 。丙瓶装的是乙瓶 发酵后的流出液，即 。流进丙瓶的速度也是 。每天用检测流出液的 pH 值，监控发 酵情况，等到流出液的 pH 值不在减少，或 时，停止实验。 实验十：泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 一、泡菜的腌制： 1. 有关微生物：泡菜制作时起主要作用的微生物是 （真菌）和 （细菌） 。 2. 制作原理：在无氧条件下，微生物发酵产生 和 。 发酵时期 乳酸菌 乳酸 亚硝酸盐 发酵前期 少（有氧气，乳酸 菌受到抑制） 少 增加（亚硝酸盐还原菌的作用） 发酵中期 最多（乳酸菌抑制
12、 其他菌） 积累增多 pH 值下 降 下降（亚硝酸盐还原菌受到抑制，部 分亚硝酸盐酶分解） 发酵后期 减少（乳酸继续积 累， pH 值继续下降 抑制乳酸菌活动） 继续增多， pH 值继 续下降 下降至相对稳定（亚硝酸盐还原菌被 完全抑制） 3 制作泡菜的流程 一、预处理 将菜洗净并切成小块 洗净泡菜坛，并家热水洗内壁 二、加料入坛 将蔬菜、盐水、白酒、调味品加入坛内 三、密封发酵 将坛口用水封好 腌制一周 四、成品 如果希望发酵快些， 可将蔬菜在 中浸泡 1 分钟后入坛， 再加些白酒。 加白酒的目的是： 。 坛口用水封好的作用：防止 ，发酵时间过长会引起 生长过多引起霉味，加入少量 泡菜汁的原
13、因是： 。 二、亚硝酸盐的测定 1.实验原理：亚硝酸盐可与 发生 反应，这一产物再与 偶联， 形成 产物，可用 定量。 2 实验步骤 样品处理:泡菜 25 g 制匀浆过滤后用 溶液调 pH 至 加 25 mL 硫酸锌溶液加氢氧 化钠溶液至产生 沉淀水浴加热至 60过滤取滤液定容至 500 mL。 测定:10 mL 样品溶液+4.5 mL 氯化铵缓冲液+2.5 mL 60%乙酸溶液+5 mL 显色液定容至 25 mL 静置 25 min用光程为 1 cm 的 在 550 nm 处测定 (10 mL 水作 对照)。 标准曲线的绘利:以 为横坐标，以 为纵坐标，绘制曲线。 实验 11 植物的组织培养
14、 1.植物组织培养原理是 。培养基主要为 MS 培养基，由 、 和 组成，可将各成分配成浓度为配方的 510 倍的 ，用时稀释。这是因为培养基中的某些元素是微 量的， 配置成高浓度有利于减少 ， 并要加入一定量的 ， 主要是 和 。 比例高时诱导 ，比例低时诱导 ，两者摩尔浓度大致相等时 继续生长而不分化。经过 计算，浙科版中生根培养基和发芽培养基的蔗糖含量是 (一样，发芽培养基中高，生根培养基中 高)。生根培养基中的营养成分要比发芽培养基中的浓度 (高，低，一样)MS 培养基是高盐培养基， 对于开始启动培养物的生长有好处，但是对于后期生根没有好处，因为 MS 培养基比土壤中的盐浓 度高。所以
15、生根培养基用的是 1/2MS 培养基，即 MS 被稀释了一倍。 2.浙科版选修三中植物组织培养的途径 a 表示 ，E 表示 ，b 表示 ，它与 a 相比分化程度低，全能性高。 d 是试管苗。若 a 是花药，则 d 是 ，继续对其使用 处理可获得染色体加倍的可 育植株。 3. 浙科版选修一描述的器官发生途径基本过程: 菊花组培先在 培养基得到 ， 后，再转到 培养基上，完成生根。试验中使用的生长 素是人工合成的 ， 细胞分裂素也是人工合成的 。 前者配溶液时 用 溶解，后者用 溶解。组培要求无 菌操作，培养基及器械用 灭菌，操作者双手用 消毒，自然生长的茎段消毒需用 及 (两次)浸泡消毒，最后在
16、 中用 清洗。注意浙科版中有发芽培养基和生 芽培养基两种说法组培苗生根后，将苗移至 或 中，用玻璃罩或塑料布遮盖作 用: 。2-3 天后打开玻璃罩，目的是: 。及时洗掉根部的 琼脂，以免琼脂发霉引起烂根。 选修一关键知识点填空选修一关键知识点填空 实验一：大肠杆菌的培养和分离 14. 细菌以二分列式二分列式繁殖。用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阴阴性和革兰氏阳阳性的细菌，大肠杆菌是 革兰氏阴性革兰氏阴性（上述种类的哪一种） 、兼性厌氧兼性厌氧（呼吸作用类型）的肠道细菌。 15. 培养基为生物生长提供营养，培养细菌常用 LB 培养基，按照物理性质分为固体固体培养基和液体液体培养 基，前者主要用于选
17、择和鉴定选择和鉴定，后者主要用于菌种的扩大培养菌种的扩大培养。区别是是否添加琼脂琼脂。灭菌之前前调节 pH 值。 16. 在培养微生物时，必须进行无菌无菌操作，首要条件是各种器皿必须无菌，各种培养基也必须是无菌 的，目前一般的灭菌方法为高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌法，121，15min，高压蒸汽灭菌锅压力必须降为 0 时才 能打开，因为培养基会因为锅内气压过大气压过大而喷出来。灭菌锅加热后，需要等到水蒸气把锅内原有的空 气赶走后，才关闭气阀，此后气压和温度持续上升到指定数值后才开始计时。如果水蒸气没有把空气 完全赶走，会导致压力达到达标值后，温度没有达到目标值（因为空气比水蒸气更容易膨胀） 。另外
18、 水蒸气的热穿透力强，有利于杀死芽孢和孢子。倒平板、接种、平板涂布、平板划线都要在酒精灯酒精灯旁 进行操作。为了使细菌繁殖更快，一般在 37的恒温箱的恒温箱中进行恒温培养，而且将培养皿倒置倒置，其主 要原因是防止冷凝水滴落冲散单菌落冷凝水滴落冲散单菌落。 17. 细菌扩大培养需要用 LB 液体液体培养基，划线分离需要用 LB 固体固体培养基，细菌喜荤荤，霉菌喜素素，通 常细菌的培养基用蛋白胨和酵母提取物蛋白胨和酵母提取物来配置，还要加入一定量的氯化钠氯化钠，以维持一定的渗透压渗透压。霉 菌培养基一般用无机物无机物或添加蔗糖的豆芽汁添加蔗糖的豆芽汁即可。 尽管培养基的配方各不相同， 但其基本成分
19、都一样 （基本成分为碳源、氮源氮源、生长因子、水、无机盐） ，实验结束后，所有接触过细菌的器皿都要灭菌灭菌 处理。 18. 细菌的分离方法有两种：涂布分离法涂布分离法和划线分离法划线分离法。划线分离法是用接种针接种针蘸取菌液后在固体培固体培 养基养基上划线，在划线过程中菌液逐渐减少。划线最后，可使细菌间的距离加大。将接种后的固体培养固体培养 基基培养 1020 小时， 一个细菌就会形成一个单菌落单菌落。 如果再将每个菌落分别接种到固体培养基的斜面斜面 试管试管，则每个菌群就是由一个细菌产生的后代。 19. 添加培养基时需要注意三角瓶口、试管口、培养皿壁上不能沾有培养基，否则容易发生污染，转 移
20、到三角牌和试管时必须使用三角漏斗三角漏斗。 20. 7.涂布分离时，需要先将培养的菌液稀释稀释，然后取 0.1ml 不同浓度的稀释度的菌液加在培养皿的固固 体体培养基上，用玻璃刮刀玻璃刮刀涂布，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。通常每个培养皿中有 20 个以内的单菌落为最合适。在数菌落时，实际菌落数比理论菌落数偏低低，原因是多个细菌可能形多个细菌可能形 成一个菌落成一个菌落。使用过的培养基应该进行灭菌灭菌处理后才能倒掉，划线划线分离法方法简单，涂布涂布分离法单菌 落更容易分开，但操作复杂。 21. 单菌落分离单菌落分离是消除杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达菌株的方法之一。 22. 实验
21、中使用的是非脱脂棉非脱脂棉（何种棉花） ；实验用具在高压蒸汽灭菌后需要烘干烘干处理；高压蒸汽灭菌 时各种器皿需要用报纸或牛皮纸报纸或牛皮纸包好。 23. 消毒和灭菌，哪个作用比较温和：消毒消毒。 24. 如果要划线 4 次，那么需要将接种环灼烧几次：5 次次。 25. 进行扩大培养时， 灼烧后的接种环如何冷却才能取菌种： 使接种环接触培养基以达到冷却的目的使接种环接触培养基以达到冷却的目的。 26. 大肠杆菌的分离实验需要未接种的培养基未接种的培养基作为对照。 实验二：分离以尿素为唯一氮源的微生物 6. 尿素又称脲脲，是蛋白质蛋白质讲解的产物，以尿素为氮源的细菌含有脲酶脲酶从而可以降解尿素。
22、7. 细菌合成的脲酶脲酶能将尿素分解成 NH3（碱性） ，使 pH 值变大大，使培养基中加入的酸碱指示剂酚红酚红 遍红红。从而根据菌落周围红色环带区域大小代表脲酶脲酶的活性。 8. 土壤是从有哺乳动物的排泄物的有哺乳动物的排泄物的地方取得。从土壤分离以尿素为唯一氮源的细菌用涂布分离涂布分离法分 离，用玻璃刮刀玻璃刮刀（仪器）涂布。本实验应配置尿素固体尿素固体培养基，并以 LB 全营养全营养培养基作为对照，在 其中的琼脂糖琼脂糖代替琼脂作为凝固剂。尿素遇高温会分解，因此不能用常规的高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌法灭菌，而 采用 G6 玻璃砂漏斗玻璃砂漏斗过滤使之无菌，之后接入灭菌后的培养基。另外酶溶液
23、也可用此方法灭菌，G6 玻璃砂漏斗只能采用抽滤抽滤的方法加快速度。尿素加入到灭好菌的固体培养基中，培养基呈现液态液态（液 态、固态） 。 9. 尿素固体培养基在功能上属于：选择选择培养基。 10. 培养时培养皿需倒置倒置（摆放方向）培养，观察菌落数，实验组平板比对照组有更少更少（更多、更少） 菌落。 实验四：果汁中的果胶和果胶酶 2. 果胶果胶是植物细胞壁的主要成分之一，作用是将植物细胞植物细胞粘合在一起，能被果胶酶果胶酶和果胶甲酯酶果胶甲酯酶水 解。 果胶只被果胶酶水解产生半乳糖醛酸半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯半乳糖醛酸甲酯。 如果果胶被果胶酶和果胶甲酯酶共同水 解产生半乳糖醛酸半乳糖醛酸。黑
24、曲霉黑曲霉和苹果青霉苹果青霉都可以产生果胶酶果胶可以用无水乙醇无水乙醇鉴定，果胶越多，沉淀 越多。因此果胶酶在果汁生产中可以提高出汁率出汁率和澄清度澄清度。 实验六：-固定化淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。 2. 固定化酶 （3）概念：将水溶性水溶性的酶用物理或化学物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水不溶于水而又有酶活性酶活性 的制剂。 （4）方法：吸附法吸附法、包埋法包埋法、共价偶联法共价偶联法和交联法交联法。 2.比较 类型 直接使用酶 固定化酶 优点 催化效率高，低耗能，低污染 c. 既能与反应物接触， 又 能与酶分离 d. 固定化酶可以被重复重复 利用利用 缺点 d.
25、 对环境要求非常敏感，容易失活 e. 成本高 f. 反应后酶混在产物中，影像产物质 量。 不能进行一系列反应的 催化。 3.-淀粉酶的固定化 （1）介质（教材中） ：石英砂石英砂， （2）方法（教材中） ：吸附法吸附法 当一定浓度的淀粉经过固定化酶柱时，淀粉水解成一种中间物质糊精糊精，该物质用 KI-I2检测，显红红色。 -淀粉酶装柱后用十倍体积的蒸馏水洗涤的目的：洗去未吸附的淀粉酶洗去未吸附的淀粉酶。实验后用十倍体积的蒸馏 水洗涤的目的：洗去残留的淀粉和糊精洗去残留的淀粉和糊精。实验后放置在 4的冰箱的冰箱中保存。 5. 此实验使用的是枯草杆菌枯草杆菌（某种生物）的-淀粉酶淀粉酶（某种淀粉酶
26、） 。 实验八：果酒和果醋的制作 4. 酵母菌是真核真核（真核或原核） ，异养，兼性厌氧型，多以出芽生殖出芽生殖进行繁殖。制作果醋的微生物是 醋杆菌醋杆菌。这两种微生物都可以在培养基中进行扩大培养扩大培养，接种后，培养液中的乙醇浓度值超过 16% 时，酵母菌会死亡。 5. 果酒制作的一般过程：葡萄消毒、冲洗、榨汁或捣烂、放入酵母、酒精发酵、过滤、沉淀。用葡 萄制作果酒，先用高猛酸钾高猛酸钾浸泡葡萄，然后用清水清水冲洗。去梗应该在此后后（前、后） 。然后用榨汁机 打成匀浆，转速要求低速低速，目的是避免将籽打碎避免将籽打碎。干酵母用少量温水少量温水调制成糊状，加入一小撮蔗糖蔗糖， 作用:激活酵母菌
27、激活酵母菌。等待酵母悬液中出现气泡气泡即可。葡萄浆放入发酵瓶装量不超过 2/3，一般酿酒适宜 温度为 25-30，瓶口橡胶塞孔插弯曲的玻璃管并装水原因排除二氧化碳，防止杂菌和空气进入排除二氧化碳，防止杂菌和空气进入，当 发酵瓶中停止冒气泡停止冒气泡的时候，即表示发酵完毕。用葡萄利作的葡萄酒不含糖，酒精含量也低。如制作 酒精含量较高，糖含量也较高的果酒可以用苹果苹果等水果，并加入蔗糖蔗糖，如用苹果汁制作果酒，3 天后 可看到气泡冒出，10 天后剧烈的发酵停止，上清液果酒可用虹吸虹吸法吸出。 6. 以下是酿酒和酿醋的简易过程 充气口设置开关:因酵母菌的大量繁殖需要氧气，醋杆菌是好氧细菌，所以在果酒
28、利作的前期和利 作果醋时利作充气口应打开打开(打开或关闭);酵母菌进行酒精发酵时充气口应关闭关闭(打开或关闭) 排气口设置弯道:由于在果酒发酵过程中产生二氧化碳产生二氧化碳，因此又需设排气口;为防止空气中微生物的 污染，排气口应连接一个长而弯曲的胶管。 (4) 出料口设置开关:因需要对发酵的情况进行及时监测，应设置开关便于取料取料。 4. 三个瓶的瓶口用铝箔铝箔盖住。甲瓶中装 800ml 酒酒-水混合物水混合物(果酒与蒸馏水的比例为 1：4)，下口有带活 塞的管道连接至乙瓶,可以通过调节活塞控利流速，流速过快会导致乙瓶发酵不彻底（流速:每 5 分钟 1 滴);乙瓶为发酵发酵瓶，内装灭菌灭菌过的
29、锯末锯末至八八分满，将适量的醋化杆菌悬液或醋曲悬液加在，并调 pH 至 7.0(用 O.1 mol/L NaOH)倒入乙瓶。锯末的作用在于增加透气性增加透气性。其下口用双孔橡胶塞塞紧。其中一 玻璃管连接至丙瓶，另一玻璃管塞有脱脂棉球，作用是防止空气中杂菌污染防止空气中杂菌污染。丙瓶装的是乙瓶发酵后 的流出液， 即果醋果醋。 流进丙瓶的速度也是每每 5 分钟分钟 1 滴滴。 每天用检测流出液的 pH 值， 监控发酵情况， 等到流出液的 pH 值不在减少，或甲瓶中的液体全部流入乙瓶甲瓶中的液体全部流入乙瓶时，停止实验。 实验十：泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 三、泡菜的腌制： 4. 有关微生物：泡菜制
30、作时起主要作用的微生物是假丝酵母假丝酵母（真菌）和乳酸菌乳酸菌（细菌） 。 5. 制作原理：在无氧条件下，微生物发酵产生有机酸有机酸和醇类物质醇类物质。 发酵时期 乳酸菌 乳酸 亚硝酸盐 发酵前期 少（有氧气，乳酸 菌受到抑制） 少 增加（亚硝酸盐还 原菌的作用） 发酵中期 最多（乳酸菌抑制 其他菌） 积累增多 pH 值下 降 下降（亚硝酸盐还 原菌受到抑制，部 分亚硝酸盐酶分 解） 发酵后期 减少（乳酸继续积 累， pH 值继续下降 抑制乳酸菌活动） 继续增多， pH 值继 续下降 下降至相对稳定 （亚硝酸盐还原 菌被完全抑制） 3 制作泡菜的流程 一、预处理 将菜洗净并切成小块 洗净泡菜坛
31、，并家热水洗内壁 二、加料入坛 将蔬菜、盐水、白酒、调味品加入坛内 三、密封发酵 将坛口用水封好 腌制一周 四、成品 如果希望发酵快些， 可将蔬菜在开水开水中浸泡 1 分钟后入坛， 再加些白酒。 加白酒的目的是： 增加醇香增加醇香。 坛口用水封好的作用：防止杂菌和空气进入杂菌和空气进入，发酵时间过长会引起霉菌霉菌生长过多引起霉味，加入少量 泡菜汁的原因是：相当于已经接种扩增的发酵菌，减少腌制时间相当于已经接种扩增的发酵菌，减少腌制时间。 四、亚硝酸盐的测定 1.实验原理：亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸对氨基苯磺酸发生重氮化重氮化反应，这一产物再与 N-1-萘基乙二胺萘基乙二胺偶联，形成 紫红色紫红色
32、产物，可用光电比色法光电比色法定量。 2 实验步骤 样品处理:泡菜 25 g 制匀浆过滤后用 NaOH 溶液调 pH 至 8.0加 25 mL 硫酸锌溶液加氢氧化钠溶 液至产生白色白色沉淀水浴加热至 60过滤取滤液定容至 500 mL。 测定:10 mL样品溶液+4.5 mL氯化铵缓冲液+2.5 mL 60%乙酸溶液+5 mL显色液定容至25 mL暗处暗处 静置 25 min用光程为 1 cm 的比色杯比色杯在 550 nm 处测定光密度值光密度值(10 mL 水作空白空白对照)。 标准曲线的绘利:以亚硝酸钠质量亚硝酸钠质量为横坐标，以光密度值光密度值为纵坐标，绘制曲线。 实验 11 植物的组
33、织培养 1.植物组织培养原理是植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性。培养基主要为 MS 培养基，由大量元素大量元素、微量元素微量元素和有有 机成分机成分组成，可将各成分配成浓度为配方的 510 倍的母液母液，用时稀释。这是因为培养基中的某些元 素是微量的，配置成高浓度有利于减少称量误差称量误差，并要加入一定量的植物激素植物激素，主要是细胞分裂素细胞分裂素和 生长素生长素。比例高时诱导生芽生芽，比例低时诱导生根生根，两者摩尔浓度大致相等时愈伤组织愈伤组织继续生长而不分 化。经过计算，浙科版中生根培养基和发芽培养基的蔗糖含量是一样一样(一样，发芽培养基中高，生根 培养基中高)。生根培养基中的营养成
34、分要比发芽培养基中的浓度低低(高，低，一样)MS 培养基是高盐 培养基，对于开始启动培养物的生长有好处，但是对于后期生根没有好处，因为 MS 培养基比土壤 中的盐浓度高。所以生根培养基用的是 1/2MS 培养基，即 MS 被稀释了一倍。 2.浙科版选修三中植物组织培养的途径 a 表示外植体外植体，E 表示再分化再分化，b 表示愈伤组织愈伤组织，它与 a 相比分化程度低，全能性高。 d 是试管苗。若 a 是花药，则 d 是单倍体植株单倍体植株，继续对其使用秋水仙素秋水仙素处理可获得染色体加倍的可 育植株。 6. 浙科版选修一描述的器官发生途径基本过程: 菊花组培先在生芽生芽培养基得到从壮苗从壮苗
35、，分株分株后，再转到生根生根培养基上，完成生根。试验中使用的生长 素是人工合成的萘乙酸（萘乙酸（NAA） ，细胞分裂素也是人工合成的苄基腺嘌呤（苄基腺嘌呤（BA） 。前者配溶液时用 0.1mol/L 的氢氧化钠溶液的氢氧化钠溶液溶解，后者用 0.1mol/L 的盐酸溶液的盐酸溶液溶解。组培要求无菌操作，培养基及器 械用高压蒸汽高压蒸汽灭菌，操作者双手用乙醇乙醇消毒，自然生长的茎段消毒需用 70%乙醇乙醇及 5%的次氯酸钠的次氯酸钠(两 次)浸泡消毒，最后在超净台超净台中用无菌水无菌水清洗。注意浙科版中有发芽培养基和生芽培养基两种说法 组培苗生根后，将苗移至草炭土草炭土或蛭石蛭石中，用玻璃罩或塑料布遮盖作用:保持保持 80%以上的湿度以上的湿度。2-3 天 后打开玻璃罩，目的是:逐渐逐渐降低湿度进行锻炼降低湿度进行锻炼。及时洗掉根部的琼脂，以免琼脂发霉引起烂根。