1、 基础再现 1与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理及其特有的促融合因子分别是( ) A细胞膜的流动性、离心 B细胞膜的流动性、灭活的病毒 C细胞的全能性、电激 D细胞的全能性、灭活的病毒 答案 B 解析 植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性，动物细胞融合的原理 是细胞膜的流动性；动物细胞融合的常用促融合因子有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等，其 中灭活的病毒是其特有的促融合因子，而聚乙二醇、电激均可用于促进植物体细胞融合。 2灭活的病毒可诱导细胞融合，克隆技术可以克服异体组织或器官的排斥，这些都依赖于细 胞的识别功能。这种细胞识别功能的物质基础是( ) A磷脂分子 B氨基酸
2、C核酸 D糖蛋白 答案 D 3目前，动物细胞融合的用途中最重要的是( ) A克服远缘杂交不亲和的障碍 B制备单克隆抗体 C培育新物种 D生产杂交细胞 答案 B 解析 动物细胞融合不像植物体细胞杂交那样主要是为了克服远缘杂交不亲和的障碍，以培 育新品种；另外，植物体细胞杂交还应用了植物体细胞的全能性；动物细胞作为整体，它的 全能性受到限制，目前只见到高度分化的细胞核在去核卵母细胞中表现出全能性，还未见到 融合细胞核表现出全能性的例子，因此动物细胞融合不能用来培育新物种；生产杂交细胞， 不是细胞融合的主要目的，杂交细胞只是细胞融合完成后所形成的结构名称。 4科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得
3、到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗 体。与骨髓瘤细胞融合的是( ) A经过免疫的 B 淋巴细胞 B不经过免疫的 T 淋巴细胞 C经过免疫的 T 淋巴细胞 D不经过免疫的 B 淋巴细胞 答案 A 解析 单克隆抗体的产生是利用了细胞工程中的细胞融合技术。小鼠的骨髓瘤细胞与经过免 疫的 B 淋巴细胞融合成杂交瘤细胞，在体外培养的条件下能无限增殖，产生特异性的单一抗 体。 5制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括( ) 细胞培养 细胞融合 胚胎移植 细胞核移植 A B C D 答案 A 解析 制备单克隆抗体时，首先采用细胞融合技术得到杂交瘤细胞，再采用动物细胞培养技 术获得能产生所需抗体的细胞群。
4、 能力提升 6下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是( ) A动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 B动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞 C常用的促进动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射 D细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 答案 C 解析 紫外线照射常用做人工诱变，可诱发基因突变，而不是促进细胞融合。 7下列有关细胞工程的说法正确的是( ) A在愈伤组织形成的过程中，除适宜的温度、pH 和无菌条件外，还需要有植物激素进行调 节 B植物体细胞杂交前需要用酶去除细胞壁获得原生
5、质体，然后再用灭活的病毒促进融合 C利用动物体细胞核移植的方法得到克隆动物是培育新物种的一种方式 D动物细胞应在含 5%CO2的恒温箱中培养，CO2的作用是为细胞提供碳源 答案 A 解析 在愈伤组织形成的过程中，需添加生长素和细胞分裂素等植物激素进行调节；灭活的 病毒是促进动物细胞融合特有的方法；核移植属于克隆，为无性生殖，不会产生新物种；动 物细胞应在含 5%CO2的恒温箱中培养，CO2的作用是维持培养液中的 pH。 8用绵羊红细胞刺激小鼠脾脏 B 淋巴细胞，再将后者与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细 胞克隆群，由此筛选出的单克隆杂交瘤细胞所产生的抗体( ) A能识别绵羊整个红细胞 B只识别绵
6、羊红细胞表面的特定分子 C能识别绵羊所有体细胞 D只识别绵羊所有体细胞表面的特定分子 答案 B 解析 单克隆抗体具有特异性强的特点，只能针对特定的抗原。本题中的抗原是绵羊红细胞 表面的特定分子，并非整个红细胞，也非其他体细胞。 9下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是( ) A制备过程中不需要动物细胞培养技术 B杂交瘤细胞具有 B 淋巴细胞与癌细胞的所有特点 C经选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞可用于单克隆抗体的生产 D单克隆抗体最广泛的用途是用做体外诊断试剂 答案 D 解析 单克隆抗体制备过程需要动物细胞培养技术培养杂交瘤细胞，故 A 错误；杂交瘤细胞 具有 B 淋巴细胞产生专一抗体和癌细
7、胞无限增殖的特点，不一定具有它们所有特点，故 B 错 误；经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和专一抗体检测，才可用于 单克隆抗体的生产，故 C 错误；单克隆抗体特异性强，灵敏度高，可大量制备，最广泛的用 途是用作体外诊断试剂，故 D 正确。 10下列关于单克隆抗体的生产和应用的叙述，错误的是( ) A对小动物注射特定抗原以获取所需的 B 淋巴细胞 B融合并筛选特定的杂交瘤细胞，原代培养发生遗传物质改变后才能进行传代培养 C特定的单克隆抗体可制成试剂，用于检测人体是否受某种抗原的感染 D治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞 答案 B 解析 单克隆抗体
8、的制备是用骨髓瘤细胞和经过免疫的 B 淋巴细胞融合后得到杂交瘤细胞； 杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限增殖的能力，又具有 B 淋巴细胞产生抗体的特点，所以不 需经过遗传物质的改变便能无限增殖；单克隆抗体最广泛的应用是作为诊断试剂；如果把抗 癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”，注 入体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物带到癌细胞所在位置，便可将癌细胞杀死。 11下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图，请据图回答下列问题： (1)_技术是单克隆抗体技术的基础。 (2)根据培养基的用途分类，图中 HAT 培养基属于_培养基。 (3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比
9、，最大的优越性是_。 (4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的促融合因子外，还可以采用_ _。 (5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞_的特点，又具备淋巴细胞 _的特点。 答案 (1)动物细胞培养 (2)选择 (3)特异性强，灵敏度高 (4)灭活的病毒 (5)在体外大量 增殖 分泌特异性抗体 解析 单克隆抗体是通过细胞融合、动物细胞培养制备的，其中动物细胞培养是动物细胞工 程的基础。由图示信息可知：图中所用的培养基是选择培养基，目的是筛选出杂交瘤细胞， 并将杂交瘤细胞分开，筛选之后进行扩大培养，从而获得大量抗体。单克隆抗体与常规抗体 相比，特异性强，灵敏度高，可被广泛应用到疾病诊断
10、、治疗和预防等方面。动物细胞融合 除了使用离心、振动、电激等物理方法和聚乙二醇等化学方法诱导外，通常还采用灭活的病 毒诱导融合。抗体是由已免疫的 B 淋巴细胞分泌的，每一种 B 淋巴细胞只能分泌一种特异性 抗体，要想得到大量的单一抗体，必须将同一种 B 淋巴细胞大量克隆，但在体外培养的条件 下，一个 B 淋巴细胞不能无限增殖，而骨髓瘤细胞可以在体外无限增殖，因此，通过细胞融 合，得到既能分泌抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞。 12某研究者用抗原(A)分别免疫 3 只同种小鼠(X、Y 和 Z)，每只小鼠免疫 5 次，每次免疫 一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)
11、，结果如下 图所示： 若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的 B 淋巴细胞(染色体数目为 40 条)，并将该细胞与体 外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目为 60 条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导 细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗 A 抗体的杂交瘤细胞。 回答下列问题： (1)制备融合所需的 B 淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到 16000 以上，则小鼠 最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的 X、Y、Z 这 3 只免疫小 鼠中，最适合用于制备 B 淋巴细胞的是_小鼠，理由是 _。 (2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细
12、胞外，可能还有 _，体系中出现多种类型细胞的原因 是_。 (3)杂交瘤细胞中有_个细胞核，染色体数目最多是_条。 (4)未融合的 B 淋巴细胞经多次传代培养后不能存活，原因是_。 答案 (1)4 Y Y 小鼠的血清抗体效价最高 (2)B 淋巴细胞相互融合形成的细胞、 骨髓瘤细 胞相互融合形成的细胞 细胞融合是随机的，且融合率达不到 100% (3)1 100 (4)不能无限增殖 解析 (1)据图分析可知，第四次注射后 X、Y、Z 小鼠的血清抗体效价几乎都达到 16000 以 上，小鼠 Y 的血清抗体的效价最高，最适合用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合 的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨
13、髓瘤细胞的自身融合细胞和 B 淋巴细胞的自身融合细胞。 细胞的融合是随机的，并且不可能所有细胞都融合，故体系中会出现多种类型的细胞。(3)动 物细胞融合后形成的是具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。杂交瘤细胞的细胞核 中的染色体数目最多为 4060100(条)。 (4)正常细胞的分裂次数是有限的， 且经过免疫的 B 淋巴细胞高度分化，不能无限增殖，而是经多次传代培养后逐渐衰老死亡。 个性拓展 13自然界中有一种含有叶绿体的原生动物眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些 动物细胞中存活。某同学提出问题：“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试 设计出下列具体的实验方案。 结合实验方
14、案回答： 实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步 骤如下： (1)中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是_。 (2)过程所用的酶是_。 (3)过程除了用电激之外，还可以用_、 _等作为促融合因子。 (4)过程动物细胞体外培养需要满足的条件是_、 _、 _、 _。 (5)在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和无菌操作，原因是各种杂菌可以在培养基 上迅速生长，培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和_争夺营养， 而且这些杂菌生长的过程中会生成大量_，导致培养物迅速死亡。 (6)在过程中， 通常要添加血清， 原因是_ _ _。 答案 (1)叶绿体 (
15、2)纤维素酶和果胶酶 (3)灭活的病毒 聚乙二醇 振动 离心(任写两种) (4)无菌、无毒的环境 充足的营养 适宜的温度、pH 气体环境 (5)培养物 对培养物有害的物质 (6)人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此， 在使用合成培养基时通常要加入血清、血浆等一些天然成分 解析 (1)根据题意可知，所选植物材料中必须含有叶绿体。(2)图中是去除植物细胞细胞壁 的过程，所应用的酶是纤维素酶和果胶酶。(3)诱导细胞融合的因素除了电激外，还有振动、 离心、 聚乙二醇、 灭活的病毒等。 (4)图中是动物胚胎细胞培养， 此过程需要满足以下条件： 无菌、无毒的环境，合适的营养，适宜的温度和 pH 以及气体环境。(5)整个实验过程中，都 是严格无菌的，否则各种杂菌会在培养基中生长，与所培养的细胞争夺营养，同时杂菌代谢 也可能会产生出对培养物有毒的物质，导致培养物死亡。(6)动物细胞培养过程中需要加入血 清或血浆， 因为动物细胞生长过程中需要一些未知成分， 而血清、 血浆中含有一些天然成分。