1、第第 2 课时课时 动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体 课后分层训练 （时间：30 分钟） 对点强化 强化点 1 动物细胞融合 1.下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ） A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的 B 淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.甲、乙两种二倍体植物体细胞杂交，获得的杂种植株后代依然为二倍体 解析 植物原生质体融合或动物细胞融合都可以用物理方法中的电刺激， A 正确； 去除植物细胞的细胞壁需要用纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需 用胰蛋白酶处理，B
2、正确；小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的 B 淋巴细胞融合 可获得杂交瘤细胞，用于制备单克隆抗体，C 正确；甲、乙两种二倍体植物体细 胞杂交，获得的杂种植株后代为异源四倍体，D 错误。 答案 D 2.“筛选”是生物工程中常用的技术手段， 下列关于筛选的叙述中正确的是 （ ） 基因工程中，目的基因是否能够成功的表达，需要在特定的选择培养基上或者 是在个体中进行筛选 单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞 单倍体育种中需对 F1的花药进行筛选 利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝”筛选出杂种植株 为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定的体细胞才能进行组织培养 A.二项 B.三
3、项 C.四项 D.五项 解析 基因工程中，虽然受体中已经成功导入目的基因，但是目的基因是否能够 成功地表达，需要在特定的选择培养基上或者个体中进行筛选，正确；制备单 克隆抗体过程中，一般需要进行两次筛选，第一次筛选是在完成细胞融合后，用 选择培养基筛选出杂交瘤细胞，正确；单倍体育种培养的花药产生的单倍体植 株，通过观察子代性状即可确定类型，所以对于 F1的花药不需要进行筛选，错 误；利用植物体细胞杂交技术培育出的“萝卜甘蓝”，需要筛选出符合人类要 求的杂种植株，正确；快速繁殖无子西瓜，不需筛选出特定的体细胞就能进行 组织培养，错误。因此，B 项正确。 答案 B 3.在单克隆抗体制备过程中，骨髓
4、瘤细胞和 B 淋巴细胞诱导融合后，先用特定的 选择培养基筛选出杂交瘤细胞。 在这种培养基上不能存活、 增殖的细胞有 （ ） B 淋巴细胞 骨髓瘤细胞 B 淋巴细胞自身融合 骨髓瘤细胞自身融合 骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合 A. B. C. D. 解析 在制备单克隆抗体时要进行两次筛选，第一次筛选是为了筛选出杂交瘤细 胞，即：可在该选择培养基中存活和增殖。 答案 A 4.如图为动物细胞融合示意图，请据图回答： （1）图中灭活的病毒的作用是_。 （2）若仅考虑两两融合，则 A 细胞和 B 细胞融合后共有 三种类 型。 （3）由杂种细胞形成无性系 1、2、3 的方法，可以称为 。 （4）此项技术最
5、重要的应用是 。 解析 （1）诱导细胞融合需要有促融剂，比如聚乙二醇、灭活的病毒等。 （2）若 仅考虑两两融合，则 A 细胞和 B 细胞融合后共有 AA、AB、BB 三种类型。 （3）无性繁殖可以称之为克隆。 （4）细胞融合技术最重要的应用是制备单克隆抗 体。 答案 （1）促进细胞融合（作为促融剂） （2）AA、AB、BB （3）克隆 （4）制备单克隆抗体 强化点 2 单克隆抗体的制备 5.单克隆抗体技术在生物工程中占有重要的地位，下列有关单克隆抗体应用的叙 述错误的是（ ） A.作为诊断试剂，具有准确、高效、快速、简易的优点 B.作为诊断试剂，可定位诊断肿瘤、心血管畸形、白化病等疾病 C.从
6、临床试验来看，单克隆抗体主要用于癌症治疗 D.在“生物导弹”中，单克隆抗体的作用是定位而不是杀伤 解析 单克隆抗体在诊断的应用上，具有准确、高效、简易、快速的优点，A 正 确；白化病的表现型非常直观，不需要单克隆抗体定位诊断，B 错误；临床试验 中，单克隆抗体主要用于癌症治疗，也有少量用于其他疾病的治疗，C 正确；在 “生物导弹”中，单克隆抗体作为瞄准装置，作用是定位，起杀伤作用的是与其 相连接的药物，D 正确。 答案 B 6.将小鼠骨髓瘤细胞与一种 B 淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆 抗体，其依据是（ ） A.B 淋巴细胞可产生抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞不产生抗体，但能无
7、限 增殖 B.B 淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体 C.骨髓瘤细胞不能无限增殖，但可以产生抗体 D.骨髓瘤细胞只有与 B 细胞融合，才能产生抗体 解析 用杂交瘤细胞生产单克隆抗体，依据的原理是 B 淋巴细胞可产生抗体，但 不能无限增殖；骨髓瘤细胞不产生抗体，但能无限增殖，A 正确；B 淋巴细胞能 产生抗体，与是否与骨髓瘤细胞融合无关，B 错误；骨髓瘤细胞能无限增殖，但 不可以产生抗体，C 错误，D 错误。 答案 A 7.下列关于单克隆抗体制备和应用的叙述，正确的是（ ） A.用特定的抗原饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离 B 淋巴细胞 B.获得的融合细胞都含有浆细胞与癌细胞的所有遗传物质 C
8、.经选择培养基筛选出的杂交瘤细胞即可生产单克隆抗体 D.最广泛的用途是用作体外诊断试剂，具有准确、快速等优点 解析 先利用特定的抗原注射小鼠，再从小鼠脾脏中分离 B 淋巴细胞，抗原主要 成分是蛋白质，蛋白质饲喂小鼠，水解失去活性，A 错误；杂交瘤细胞具有浆细 胞与癌细胞的所有遗传物质，获得的融合细胞包括杂交瘤细胞、浆细胞自身融合 型、癌细胞自身融合型，B 错误；选择培养基筛选出的杂交瘤细胞还需通过抗体 检测后才能通过体外或体内培养生产单克隆抗体，C 错误；单克隆抗体制备最广 泛的用途是用作体外诊断试剂，具有准确、快速等优点，D 正确。 答案 D 8.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂
9、交细胞，经培养可产生大量 的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的 B 淋巴细胞 B.不经过免疫的 T 淋巴细胞 C.经过免疫的 T 淋巴细胞 D.不经过免疫的 B 淋巴细胞 解析 单克隆抗体是杂交瘤细胞合成并分泌的，杂交瘤细胞是经过免疫的 B 淋巴 细胞与骨髓瘤细胞融合形成的。 答案 A 9.人绒毛膜促性腺激素 （HCG） 是女性怀孕后胚胎滋养层细胞分泌的一种糖蛋白， 制备抗 HCG 单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是制备流程示意图，请分析回 答： （1） 制备单克隆抗体过程中要用到 和 技术 （填动物细胞工程技 术） 。 （2）在 B 淋巴细胞内 DNA 合成有 D 和 S
10、 两条途径，其中 D 途径能被氨基嘌呤 所阻断。骨髓瘤细胞的 DNA 合成没有 S 途径，但能不断分裂增殖。 HAT 培养基含有多种成分，其中添加的 成分具有筛选杂交瘤细胞的 作用。 最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是 。 培养杂交瘤细胞的条件包括： 无菌、 无毒的环境、 营养、 、 。 （3）用最终筛选得到的杂交瘤细胞生产单克隆抗体，除图中所示方式外，还可以 将杂交瘤细胞注射到小鼠 中，最终从小鼠的 中提取 单克隆抗体。 解析 （1） 制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。（2） 利用 DNA 合成途径不同的特点及配制的 HAT 培养基含有多种成分，其中添加 的氨基嘌呤具有
11、筛选杂交瘤细胞的作用。杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分 泌特异性抗体。培养杂交瘤细胞的条件包括：无菌、无毒的环境、营养、温度 和 pH、气体环境。 （3）最终生产单克隆抗体的方式有两种，一种是体外培养，如 题图所示，另一种是体内培养，即：在小鼠的腹腔内培养，最终在小鼠的腹水中 提取单克隆抗体。 答案 （1）动物细胞培养 动物细胞融合 （2）氨基嘌呤 能无限增殖并分泌特异性抗体 温度和 pH 气体环境 （3）腹腔 腹水 10.如图是制备抗 X 抗体的过程，根据图解回答问题： （1）给小鼠注射抗原的目的是 。 （2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它 们融合后的杂
12、交瘤细胞具有 的特性。 （3） 由图可看出， 单克隆抗体制备过程运用了 和 的动 物细胞工程技术手段。 （4）动物细胞培养基中含有糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物组织培养的 培养基有所不同的是，通常动物细胞培养基中还含有 。 （5） 在动物细胞融合过程中， 需要将所选取的组织细胞离散开， 以利于细胞融合， 可用 处理离体组织。 （6） 图中有两次筛选过程， 其中步骤的目的是筛选出 ， 步骤 的目的是筛选出 。 （7）如需要大量产生这种抗 X 的抗体，对已获取的能产生单克隆抗体的杂交瘤 细胞如何培养？ 。 解析 （1）用特定抗原刺激小鼠，小鼠体内便可形成相应的 B 淋巴细胞，B 淋 巴细胞能
13、分泌抗体。 （2）杂交瘤细胞具有两种细胞的遗传物质，既能产生所需抗 体，又能大量增殖。 （3）从图中可看出，单克隆抗体的制备运用了动物细胞融合 技术和动物细胞培养技术。 （4）动物细胞培养基与植物组织培养的培养基相比， 最大的不同是动物细胞培养基中含动物血清。 （5）细胞融合是单个细胞和单个细 胞的融合，为使动物细胞离散开来，可用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理离体组 织。 （6）在单克隆抗体制备过程中，由于从小鼠体内提取的 B 淋巴细胞可能有多 种以及细胞融合的方式有多种，会产生多种融合细胞以及多种杂交瘤细胞，因此 需多次筛选。从图中可看出，步骤是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，步骤 是筛选出能产
14、生抗 X 抗体的杂交瘤细胞。 （7）培养杂交瘤细胞的方法有体内培 养和体外培养。前者的优点是培养条件简单，无需配制培养液；后者的优点是在 短期内获得大量单克隆抗体。 答案 （1）获得能产生相应抗体的 B 淋巴细胞 （2）既能大量增殖，又能产生特定抗体 （3）动物细胞融合 动物细胞培养 （4）动物血清 （5）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） （6）杂交瘤细胞 能产生抗 X 抗体的杂交瘤细胞 (7)可进行体外培养。需要配制相应的培养液，控制好 pH 和温度等(也可将杂交瘤 细胞注射到小鼠腹腔内) 综合强化 11.抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两个合成途径的研究。 下列是利用 生物学技术制备抗体的两
15、个途径模式简图。下列说法错误的是( ) A.过程至所获取的抗体称为单克隆抗体 B.过程至获取抗体的技术称为转基因技术 C.过程需要限制性核酸内切酶和 DNA 聚合酶 D.V1 基因体外扩增的技术称为 PCR 技术 解析 据图分析，细胞 A 表示效应 B 细胞， Y 细胞表示杂交瘤细胞，过程表 示动物细胞融合，过程动物细胞培养，过程提取信使 RNA，过程表示逆转 录，表示基因表达载体的构建，甲表示重组质粒，表示将目的基因导入受体 细胞。过程至是通过动物细胞融合技术获得单克隆抗体的过程，A 正确；过 程至获取抗体的过程是一个完整的基因工程的过程，包括目的基因的获取、 构建基因表达载体、 将目的基因
16、导入受体细胞、 目的基因的检测与鉴定， B 正确； 过程是构建基因表达载体的过程，需要限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶，C 错误；PCR 技术可以实现目的基因在体外的大量扩增，D 正确。 答案 C 12.下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，错误的是( ) A.制备单克隆抗体运用的技术有：动物细胞培养和动物细胞融合 B.需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞 C.需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞 D.利用“生物导弹”治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞的特性 解析 “生物导弹”由单克隆抗体跟化学药物、细胞毒素或放射性同位素等相结 合而成，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所
17、在位置，在原位 杀死癌细胞，D 错误。 答案 D 13.如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述错误的是( ) A.图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B.利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙 C.用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生 长 D.对丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体 的丁 解析 由图可知，甲为相应的抗原，A 正确；诱导动物细胞融合的方法有：物理 法(如：电激)、化学法(如：聚乙二醇)和生物法(如：灭活的病毒)，B 正确；用特 定的选择培养基对乙进行筛选，即第一次
18、筛选，目的是得到杂交瘤细胞，即：融 合的细胞中只有杂交瘤细胞能够生长，C 错误；丁为经第二次筛选(包括克隆化培 养和抗体检测)得到的能产生抗胃癌单克隆抗体的杂交瘤细胞，D 正确。 答案 C 14.疫苗和抗体已被广泛应用于预防与诊疗传染性疾病的过程， 已知某传染性疾病 的病原体为 RNA 病毒，该病毒表面的 A 蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的 制备流程如图所示，请回答下列问题： (1)过程代表的是 ，过程构建 A 基因表达载体时，启动子和终 止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的 所识别，以便于其催 化转录过程。 (2)在给小鼠皮下注射 A 蛋白时，要重复注射几次，目的是通过二次免疫，增加
19、小 鼠体内的 数目。过程的实质为 。 (3)在将 X 进行扩大培养前，至少需要经过 次筛选，扩大培养的原理是 _。 (4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 来制 备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病 毒进行核酸序列比较，或用图中的 与分离出的病毒进行特异性检 测。 解析 (1)由图分析可知过程是逆转录过程，过程是获取目的基因，过程是 构建 A 基因重组载体，启动子能被受体细胞的 RNA 聚合酶所识别，以便于其催 化转录过程。(2)在给小鼠皮下注射 A 蛋白时，要重复注射几次，目的是通过二次 免疫，增加小鼠体内的浆细胞数目。过程表示 B
20、细胞的增殖和分化过程，其实 质为基因的选择性表达。(3)在将 X 进行扩大培养前，至少需要经过 2 次筛选，第 一次筛选是筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选是筛选出能够产生特异性抗体的杂交 瘤细胞，扩大培养的原理是细胞增殖(有丝分裂)。(4)对健康人进行该传染病免疫 预防时，可选用图中基因工程生产的 A 蛋白来制备疫苗。对该传染病疑似患者确 诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或采用 抗原抗体杂交法，即用图中的抗 A 蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。 答案 (1)逆转录 RNA 聚合酶 (2)浆细胞 基因的选择性表达 (3)2 细胞增 殖(有丝分裂) (4)A 蛋白 抗 A 蛋白的单克隆抗体